一、常用培養基的制備
(一)普通肉湯培養基
【材料】
1. 新鮮牛肉或牛肉膏,蛋白胨,氯化鈉,瓊脂,蒸餾水。
2. 酚紅指標劑,比色架及標準比色管或精密pH試紙。
3. 漏斗,量筒,三角燒瓶,試管等。
【方法】
1. 稱取去脂去腱絞碎的鮮牛肉500克,浸于1000毫升蒸餾水中,冰箱過夜,次日煮沸30分鐘,紗布過濾,蒸餾水補足其量,(也可用牛肉膏3克加蒸餾水1000毫升加熱溶化),即為肉浸液。
2. 取肉浸液1000毫,氯化鈉5克,蛋白胨10克混合加熱溶化。
3. 調整PH為7.6,用濾紙過濾分裝于中試管或三角燒瓶內,塞緊棉塞。
【用途】
供基礎培養基用,營養比肉膏湯好,一般營養要求不高的菌均可生長。
(二)普通瓊脂培養基
瓊脂是石花菜等海藻類提取的膠體物質,其化學成份主要是多糖。當溫度達到98℃以上可溶解于水,45℃以下則凝固。瓊脂對細菌一般無營養作用(除自然界中極少數菌可利用瓊脂之外),純屬賦形劑。便于人們制做斜面、平板、高層等不同類型的固體培養基。
【材料與方法】
普通肉湯培養基100毫升,加入瓊脂2~3克,加熱溶化,用蒸餾水補足失去水分,調整PH為7.6后分裝中試管、平皿等器皿,高壓蒸氣15磅滅菌20分鐘,可制成普通瓊脂斜面和普通瓊脂平板。
【用途】
供一般細菌培養用,并可作無糖基培養基。
(三)半固體培養基
【材料與方法】
取普通肉湯培養基100毫升,加入瓊脂0.5~0.7克,加熱溶化。調整PH為7.6,分裝于小試管內,每管1~5毫升,高壓蒸氣磅滅菌20分鐘,待冷后放入4℃冰箱備用。
【用途】
保存一般菌種用,并可觀察細菌的動力及生化反應。
(四)血液瓊脂培養基
【材料與方法】
將高壓滅菌后普通瓊脂培養基。冷至45℃~50℃時以無菌手續操作加入5%~10%血液(人或動物脫纖維無菌血液)。可制成血平板和血斜面。
【用途】
供營養要求較高的細菌分離培養用,亦可觀察細菌的溶血特征。
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