實驗室生物安全
一、危險生物材料:存在、或產生于工作環境，可能導致群體或個人的健康危害的生物介質或物質
二、危險生物介質
分為8 組:
（1）培養的動物細胞，并可能發生感染
（2）靈長類動物體液和可能傳染的醫用樣品
（3）微生物類包括細菌、病毒、真菌、立克次氏體和Chlamydiae 等
（4）寄生蟲
（5）過敏原、
（6）實驗動物組織包括動物頭屑
（7）植物病毒、細菌和真菌
（8）生物毒素（細菌、動物或植物）
三、實驗室生物安全
1、實驗室常用危險生物材料的兩個主要來源:
（1）微生物實驗室試驗用病原體
（2）用于化學分析的生物液體樣品（如血漿、尿）
2、世界衛生組織對病原體危險性分組
第一組介質：低個體和群落風險
第二組介質：中度個體風險，有限群落風險
第三組介質：k高個體風險，低群落風險
第四組介質：高個體風險，高群落風險
3、第一組介質
非病原體細菌、真菌
無需特殊設備或操作
標準的設計合理的實驗動物、實驗設備及滿足基本安全試驗操作
必須提供洗手池
d必須合理使用消毒劑
4、第二組介質
大腸桿菌、沙門氏菌、 ringworm真菌、流行性感冒病毒和單純皰疹病毒
實驗室與其它活動分開，貼有危險生物標志，室內臺面防滲，隨時可進行清潔
實驗設施包括高壓滅菌鍋、 高效空氣過濾器、一級或二級生物安全柜
所有污染材料須經凈化
5、第三組介質
炭疽、結核、愛滋和hanta病毒
實驗室須專門設計，雙道門和淋浴
所有墻體滲漏必須進行密封
通風系統必須保證與周圍區域一直呈負壓，不可使空氣再流通
空氣排放須經過專用排氣系統或高效空氣過濾器系統
實驗室窗戶須密閉并不可擊碎
應有備用發電機
經鑒定的高效空氣過濾器二級生物安全柜
在出口處設有專門的可用腳、膝蓋或自動控制的洗手池
6、第四組介質
具有傳染性的介質全部為病毒
（1）Ebola viruses埃博拉病毒
（2）Herpes B virus (Monkey virus) B 皰疹病毒
（3）Foot and Mouth Virus腳和口病毒
最高級別屏蔽
設立一個設備齊全的隔離單元，完全能夠獨立操作
設備專門設計，由空氣鎖控制出入
三級生物安全柜，正壓通風
為全面控制污染物，采用單獨的通風系統
四、接觸途徑
主要為：口、 呼吸 、皮膚劃傷、皮膚滲透、結膜、帶菌者（蚊子、跳蚤、虱子）
傳染途徑中有65-75% 是呼吸造成的
因此實驗操作中接觸危險生物材料或潛在傳染性材料時，了解其危害，采用適當技術防止不必要的接觸十分關鍵
五、第一道隔離
1、當工作中與傳染性生物體接觸時，第一道隔離是第一道防衛
（1） 手套箱
（2） 生物安全柜
（3） 動物籠養
2、第一道隔離一般原則：
（1）隔離體積最小化
（2）采用安全的從容器中取放材料的方法，勿毀壞隔離
（3）采用凈化隔離欄和污物的方法
3、生物安全柜分為3 種 ：
（1）一級–保護操作者和環境
二級–保護操作者、環境和產品
三級– 用于第4 類危險品的操作，最大限度保護操作者、環境和產品
（2）一級生物安全柜
類似化學實驗室的通風櫥，排出的氣體要通過高效空氣過濾器，常常用于放置離心機和天平
二級生物安全柜
提供氣流向下的經高效空氣過濾器凈化的空氣，保護產品
進一步基于排氣/ 再循環空氣比值進行細化為A 、B1 、B2 和B3 型
Type A – 75 fpm face velocity, 30% internal exhaust
Type B1 – 100 fpm, >50% external exhaust
Type B2 – 100 fpm, 100% external exhaust
Type B3 – 100 fpm, 30% external exhaust
第四組介質
密閉單元– “ 手套箱”
排氣須經過雙層的高效空氣過濾器或其它處理方法（如空氣焚燒），阻止第四組介質進入環境
六、第二道隔離
第一道隔離失敗
工作服及其它個人防護用品成為重要的防線
七、凈化
1、Sterilization 殺菌
（1）完全阻止生物介質的可能傳染
（2）常用高壓滅菌鍋
2、消毒
（1）減少微生物病原體的數量和繁殖，使其無法傳播疾病
（2）121˚C 蒸15 分鐘
（3）干燥加熱需160-170˚ 2-4 小時
3、Mode of action
（1）細胞溶解
（2）蛋白凝固或變性
（3）酶變性或失活
（4）酶作用物破壞
八、主要化學消毒劑
(1) 醇類
(2) 甲醛
(3) 酚化合物
(4) 季銨鹽
(5) 氯化物
(6) 碘化物
(7) 戊二醛
(8) 過氧化氫
(9) 六氯化合物
1、醇類
乙醇或丙醇
蛋白質變性
對含油脂病毒、膜包被病毒和植物細菌有效
對分支桿菌和真菌作用小
可燃、遇有機物活性差、揮發
2、醛類
蟻醛和戊二醛
對廣譜微生物有效
作用時間長（20-30分鐘）
對有機體的去活作用小
使用有效期短
對人體健康有害-呼吸刺激、接觸性皮炎
3、酚類
常為分化合物清潔劑
（1）對植物細菌、真菌和含脂病毒有效
（2）pH范圍寬
（3）皮膚和眼的刺激
（4）對孢子無效
4、季銨鹽化合物
陽離子清潔劑 /強表面活性劑
（1）對植物細菌（部分）和不含脂病毒有效
（2）穩定、無刺激
（3）對分支桿菌、含脂病毒和孢子無效
（4）Neutralized by organic material (esp. proteins)與有機物（特別是蛋白）中和
5、氯化物
強氧化劑
（1）普遍采用的純化劑
（2）用家用漂白劑或自來水稀釋制備成1/100 或 1/50 （對孢子和分枝桿菌）溶液
（3）稀釋溶液不穩定，常配
（4）用有機物質中和
（5）具腐蝕性
6、碘化物
與氯相似
（1）Effective against vegetative bacteria and viruses 對植物細菌和病毒有效
（2）Less corrosive and toxic than chlorine 比氯的腐蝕性和毒性低
（3）Self-indicating 自顯示: brown 棕->yellow 黃->clear 無色
（4）May stain surfaces使表面染色
（5）用有機物中和
7、過氧化氫
強氧化劑
（1）濃度6% 的溶液即對植物細菌、分支桿菌、真菌和病毒有效
（2）殺孢子能力有限
（3）不穩定
（4）對某些金屬具有腐蝕作用
8、消毒
（1）消毒效果取決以下因素
（2）化學試劑濃度
（3）有機體的存在
（4）化學試劑的作用時間
（5）化學試劑的溫度和pH 值
（6）污染程度
（7）污染類型
（8）污染物/ 表面的物理性質
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