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抑菌劑在開放組培中的使用及效果研究二



錄入時間:2009-7-13 14:29:10 來源:青島龙8娱乐官方网站生物

2 結果
2.1
革蘭氏染色法初步鑒定細菌
結果表明:紅色菌落的菌株為微球菌,乳白色菌落的菌株為葡萄球菌,均為革蘭氏陽性菌.
2.2
抑菌劑對抑菌強度的影響(見表1 )
6
種抑菌劑中,多菌靈除了不能有效抑制葡萄球菌和杜氏青霉外,對其他菌種抑制效果比較明顯;Yl 1 和代森猛鋅對供試的6 種菌抑菌作用具廣譜性,但不能較好地抑制杜氏青霉,僅能在其生長初期18h 內有抑制作用,24h 后抑菌圈逐漸被蔓延的菌絲覆蓋;冠菌清和撲海因對上述6 種病原菌無抑菌作用,百菌清僅對黑曲霉有微小抑制作用(見圖1 ) .因而,本實驗篩選多菌靈、Yl 1 和代森猛鋅對微球菌、葡萄球菌、棕曲霉、黑青霉作進一步實驗.

2.3 最低抑菌濃度測定(見表2 )
由表2 可以看出,多菌靈對微球菌最低抑菌濃度是15.625 mg / L ; Yl 1 對微球菌、葡萄球菌最低抑菌濃度均是62.5 mg / L ;代森猛鋅對微球菌、葡萄球菌最低抑菌濃度分別是250 62.5 mg / L
2.4
抑菌劑對霉菌菌絲生長的影響(見圖2 )
多菌靈對棕曲霉、黑青霉菌絲生長抑制作用最強,不同濃度的多菌靈在10d 內觀察,菌絲生長相對抑制率均為100; Yl 1 對菌絲生長的抑制作用次之,其對棕曲霉菌絲生長的最低抑菌濃度為15.625 mg / L ,對黑青霉菌絲生長最低抑菌濃度為7.812 5 mg / L ,第10 天的抑制率分別為100 %和97.4 % ;而代森猛鋅相比之下抑制作用最弱,其對棕曲霉和黑青霉菌絲生長最低抑菌濃度均為125 mg / L ,第2 天的抑制率分別為95.5 %和100 %.

2.5 抑菌劑對孢子萌發的影響
根據表1 2 及圖1 的結果,選擇抑菌作用具廣譜性的Yl 1 作以下實驗.
結果表明:Yl 1 對棕曲霉、黑青霉孢子萌發具有明顯的抑制作用.0.9765625mg /L 創的Yl 1 對棕曲霉孢子萌發抑制率仍可達60.0 % ,對黑青霉泡子萌發抑制率可高達80.8 % ,并可使黑青霉孢子形態大小不一,而大于0.976 562 5 mg / L Yl 1 可完全抑制棕曲霉和黑青霉孢子的萌發.
2.6  Yl
1 對植物生長的影響和開放組培初探(見表3 )
根據表2 ,選擇濃度為1 000 , 25062.5mg / L 分別代表高、中、低3 種濃度.實驗結果表明:高濃度和中濃度的Yl 1 對馬鈴薯試管苗生根、發育有明顯的抑制作用,而低濃度的YI 1 不僅能有效抑制試管苗的污染情況,而且對試管苗的生長發育無抑制作用(見圖3 ) .在開放組培初探實驗中,對照污染率為33.3 % ,高、中、低3 種濃度污染率均為零.

3 討論
上述6 種病原菌進行體外抑菌實驗結果表明,多菌靈不能有效抑制微球菌和杜氏青霉,代森猛鋅雖對黑曲霉有較強的抑制作用,但對棕曲霉和黑青霉菌絲生長抑制作用較弱,而Yl 1 對以上菌種都有不同程度的抑制作用,抑菌作用具廣譜性.Yl 1 對微球菌、葡萄球菌的最低抑菌濃度均為62.5 mg / L ;對棕曲霉菌絲生長最低抑菌濃度為15.625 mg / L ,對黑青霉菌絲生長最低抑菌濃度為7.812 5 mg / L ;對棕曲霉、黑青霉孢子萌發最低抑菌濃度均為3.906 25 mg / L .在對植物生長影響試驗中,62.5 mg / L YI 1 對馬鈴薯試管苗生根、分化及生長無抑制作用,且在開放組培中未發生污染.因而,從抑菌作用的廣譜性、顯著性及對植物生長無抑制作用這3 個角度出發,本試驗研究表明,Yl 1 可用作植物組織培養中的抑菌劑.
在開放組培初探中,Yl 1 2Od 中能有效抑制試管苗的污染,使開放組培的實現成為可能.關于Yl 1 的抑菌機理還有待于進一步研究.

 

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