理化學因子對病毒的作用-病毒的保存
錄入時間:2009-6-16 14:14:14
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短期保存病毒,可直接或懸浮于50%甘油鹽水中,置-30℃冰箱中保存。長期保存病毒,一般應用下述兩種方法:[BT4]1.快速低溫冰凍于病毒懸液內加入滅活的動物血清或其它蛋白保護劑,最好再加一些二甲基亞砜(例如5%~10%),并迅速冷凍和保存于-70℃或-196℃。含病毒的組織材料可以直接低溫冰凍保存;如先浸入50%甘油緩沖鹽水中,再行低溫保存,效果更好。〖BT4〗2.冷凍干燥在真空條件下使冰凍的病毒懸液脫水。通常是用低溫脫水法,并以干燥劑或冷凝法除去冷凝器內尚未凝結的多余水汽。常用的干燥劑有五氧化二磷、硫酸鈣、氯化鈣和硅膠等。冷凍干燥毒種時,一般應用脫脂牛乳、滅活的正常動物血清、飽和蔗糖溶液等作為保護劑。真空干燥時,將病毒懸液與5~10倍量的保護劑混合,分裝安瓶,每支02~05ml,立即放入事先預冷的-30~-40℃酒精 中凍結1~2小時,隨后迅速置于盛有干燥劑的干燥器內,立即抽氣干燥。充分干燥后,打開干燥器取出干燥毒種安瓶,再行抽氣使其真空,并在火焰上熔封安瓶口。這樣的凍干毒種一般可在4℃冰箱內保存幾年到十年以上。某些類型的凍干機采用低溫凝結干燥法, 是使凍干材料中的水汽通過低溫冷凝器,凝結成冰,逐漸脫水干燥。現代凍干機具有冷凍、干燥和抽真空等操作的全套裝置,使用十分方便。
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