由于多數病毒在細胞外較快滅活，特別是在炎熱季節，披膜病毒、正粘病毒和副粘

病毒等在外界環境以及腐敗的動物尸體中迅速死亡，所以只要將污染的設備或房舍閑置幾天，即可達到自然消毒目的。痘病毒和某些皰疹病毒在外界環境中的抵抗力較強，在有蛋白質性保護層例如痂皮時，更能長期活存，這就要求應用有效的消毒劑。�ゲ《緦W實踐中經常應用燒堿等作環境消毒劑，實驗室內則常應用高錳酸鉀、雙氧水和次氯酸鹽等氧化劑。福爾馬林也有較強的消毒作用，但作用較慢，且因對鼻、眼等粘膜具有較大的刺激性和不良氣味，故不被經常采用。石炭酸和煤酚類消毒劑如來蘇兒，并不屬于特別有效的病毒消毒劑，通常需用較大濃度，才能達到完全消毒的目的。由于國內供應較多，且價格便宜，來蘇兒一直在被廣泛應用，但不宜用于口蹄疫病毒。��對于不耐酸的病毒，實驗室內較常應用1%鹽酸溶液浸泡玻璃和塑料制品，如吸管和微量培養板、滴定板等。�キh氧乙烷等氣體消毒劑由于有較強的穿透作用，可以用于無菌室、污染的工作服、實驗器材、超凈工作臺等的消毒。�ビ绊懴�毒劑作用效果的因素很多，如消毒劑的濃度、消毒環境的溫度、濕度、pH、病毒的種類及有無有機物存在等，因此在實際消毒中，要根據病毒的種類，選擇合適的消毒劑和濃度，控制環境條件，方能取得理想的消毒效果。�ピ诳茖W研究和生產實踐中，經常還要觀察和比較消毒劑的殺病毒效果，測定消毒后病毒被滅活的程度。為此，必須進行殺病毒試驗。其一般程序是將經過處理的樣品接種于雞胚、組織培養細胞或敏感的動物，培養后觀察有無殘留病毒生長，并與對照樣本相比較，求出病毒滅活的水平。�ブ劣诓《緶缁畹胶畏N程度才算消毒合格，目前國內外都沒有統一標準。國外一般要求消毒后病毒滴度比消毒前降低3個log(3個數量級)。蘇格蘭農業部門規定，用口蹄疫病毒和雞新城疫病毒進行消毒試驗時，要求消毒后病毒的滴度比消毒前滴度降低4個log。我國習慣用滅活率來表示消毒效果，滅活率應達到99��9%～99��99%。�ァ糐Z〗滅活率=〖SX(〗消毒前病毒量-消毒后病毒量〖〗消毒前病毒量〖SX)〗��測定消毒劑殺病毒作用的試驗，國內外迄今沒有統一的標準，下面介紹幾種應用較多的方法。�ァ糂T4〗1.布片載體消毒試驗��劉育京等在觀測流感病毒(疫苗株)消毒效果時曾應用這種試驗。其方法是將脫脂布片(棉布或亞麻布)浸入適當稀釋的流感病毒液中30分鐘后，取出置37℃溫箱干燥15分鐘，放冰箱備用。試驗時將試驗組布片按預定時間暴露于消毒劑，對照組布片不暴露于消毒劑。然后按預定時間回收病毒：方法是將每個布片放入5ml滅菌肉湯或生理鹽水(含適當濃度的可中和消毒劑的化學物質及青、鏈霉素各100U/ml或100μg/ml)，用力吹打80次，洗下樣片上的病毒。將樣片的洗液作系列10倍稀釋，然后各稀釋度分別吸取0��2ml，接種雞胚，每個稀釋度接種雞胚4只；將接種的雞胚放37℃溫箱，培養48～72小時；用1%雞紅細胞懸液與雞胚囊液作血凝試驗，有陽性者說明雞胚被感染。本試驗除設置未經消毒處理的病毒樣片對照外，還應設置經消毒處理的未感染病毒樣片對照、未接種樣片洗液的雞胚對照和細胞毒性對照——用消毒劑和中和劑混合液接種雞胚。�ト糇鞫ㄐ栽囼灒�可用樣片洗液的原液接種雞胚，以消毒組樣片接種的雞胚全部陰性為消毒合格。但試驗應重復5～10次，以求得穩定的結果。�ト糇鞫�量分析，可求出對照樣片和消毒樣片各自的半數雞胚感染劑量(EID����50��)(見本書第十四章)，并計算出病毒滅活率。�ァ糂T4〗2.載體環消毒試驗��1964年，Lorenz和Fenn用這種試驗方法檢查了幾種消毒劑對雞新城疫病毒的滅活作用。具體方法是取20個載體不銹鋼環放入20ml澄清的病毒尿囊液中，浸泡15分鐘后取出，放于瓷盤內，于37℃干燥20～60分鐘備用。試驗時，將消毒劑作系列稀釋，每管10ml，放于20℃；每管放入載體環一只，間隔時間為1分鐘，共10只染有病毒的載體環被浸入消毒液內；在第一個載體環放入后10分鐘，將其取出，放入1ml營養肉湯管內(成含有適當濃度的可中和消毒劑的物質)，1分鐘后，將第二只載體環轉移入肉湯管內，如此直至10只載體環全部轉移入肉湯管，肉湯管也放在20℃下。最后一個載體環取出后，立即取每個肉湯洗液0��1ml接種10～20天的雞胚，每管肉湯接種6個雞胚，應在15分鐘內將60個雞胚接種完畢。接種后每天在照蛋燈下檢蛋，接種24小時內死亡的雞胚應從試驗中剔除。從接種后24小時到120小時的96小時內，若有雞胚發生死亡，則可判斷為該濃度不能滅活病毒。若全部雞胚都存活，則該稀釋度可被判斷為消毒有效的稀釋度。�ミ@一試驗不僅用于能引起雞胚死亡的病毒作試驗。而且能引起雞胚絨毛膜囊膜形成痘斑和能阻止雞胚發育的病毒也可進行此試驗。該方法經改進后，也可用于檢查消毒劑對適于組織培養的其它病毒的消毒效果。�サ玏right等用水泡性口炎病毒進行本試驗時，發現載體環傳染病毒的回收率低。Chen也發現，殺菌性試驗中用的不銹鋼環載體不能攜帶足夠濃度的單純皰疹病毒，所以不能用于殺病毒試驗。�ァ糂T4〗3.漂浮載體消毒試驗��Groen等設計了“殺病毒劑漂浮技術”，測定甲醛和戊二醛以及次氯酸鈉等的殺病毒效力，取得較好結果。據認為還可用于其它對細胞培養物毒性很強的消毒劑的殺病毒效果試驗。方法是將2%的瓊脂糖塊切成約1cm��3的小塊，置于載玻片的一端。將已知量的病毒懸液滴于瓊脂糖塊的表面，任其擴散、蒸發，直至表面完全干燥，此過程約需10分鐘。隨后加二滴溶于二氯乙烷的0��5%(W/V)聚乙烯醇縮甲醛(BDH)，待其停留幾秒鐘，將載玻片垂直立于吸水紙上，以除去多余的聚乙烯醇縮甲醛。干燥后用銳利的刀片修切瓊脂糖塊的邊緣。隨后輕輕浸入消毒劑溶液中。這樣，一個含有病毒的薄膜片就釋放并“漂浮”于消毒液的表面。記錄消毒劑與病毒接觸的時間。隨后用一根封口的毛細吸管將該薄膜片從消毒劑溶液中取出，輕輕接觸1支滅菌試管的管壁，以除去多余的消毒劑。隨后將薄膜片轉移到1ml的組織培養液中，再用封口毛細吸管將薄膜片弄碎，使剩余的病毒粒子釋放到液體中，并用之接種細胞培養物，滴定殘活的病毒。對照組用組織培養液代替消毒劑溶液。4.水懸浮消毒試驗�ピ撛囼灢唤柚�于其它固相載體，直接將試驗的消毒劑溶液與未經稀釋的病毒懸液0��1ml相混合(有些研究中將病毒稀釋至1：100)，在室溫下接種1、3、5和10分鐘后，用肉湯將病毒�蚕�毒劑混合物作10倍連續稀釋，至病毒滴度的終點。未用消毒劑作用的對照組也如此稀釋。因為消毒劑對組織培養細胞有毒性，所以測定從10��－��３稀釋度開始，每個稀釋度取0��1ml(用10����－３��～１０����-7��或10����-8��稀釋度)接種培養。對流感病毒，接種孵育10天的雞胚尿囊腔，培養40小時以后用血凝試驗檢查尿囊腔有無病毒存在。對單純皰疹病毒、牛痘病毒和腺病毒，用其稀釋液接種HeLa細胞，于37℃培養4～7天后，觀察細胞病變。測定試驗組的病毒滴度，并與對照組相比較，即可計算出消毒劑對各該病毒的殺滅作用及有效濃度。