組織培養的條件 
 
1、實驗室
    在進行植物組織培養工作之前，首先應對工作中需要哪些最基本的設備條件有個全面的了解，以便因地制宜地利用現有房屋，或新建、改建實驗室。實驗室的大小取決于工作的目的和規模。以工廠化生產為目的，實驗室規模太小，則會限制生產，影響效率。在設計組織培養實驗室時，應按組織培養程序來沒計，避免某些環節倒排，引起日后工作混亂。植物組織培養是在嚴格無菌的條件下進行的。要做到無菌的條件，需要一定的設備、器材和用具，同時還需要人工控制溫度、光照、濕度等培養條件。
    （1）實驗室設計原則：保證無菌操作，達到工作方便，防止污染。
     (2)實驗室組成：化學實驗室、洗滌菌室、無菌操作室（接種室）、培養室、細胞學實驗室。化學實驗室（準備室）：完成所使用的各種藥品的貯備、稱量、溶解、配制、培養基分裝等。主要設備：藥品柜、防塵櫥（放置培養容器）、冰箱、天平、蒸餾水器、酸度計及常用的培養基配制用玻璃儀器.
    洗滌、滅菌室：完成各種器具的洗滌、干燥、保存、培養基的滅菌等。主要設備：水池、操作臺、高壓滅菌鍋、干燥滅菌器（如烘箱）等。
    無菌操作室（接種室）：主要用于植物材料的消毒、接種、培養物的轉移、試管苗的繼代、原生質體的制備以及一切需要進行無菌操作的技術程序。無菌室的建造要求嚴格，接種室宜小不宜大，一般7～8平米，要求接種室干爽安靜，清潔明亮，除出入口和通氣口外，應當密閉，配置拉動門，以減少開關門時的空氣擾動，用紫外光燈滅菌后，能較長時間保持無菌狀態。為避免消毒藥品的腐蝕，地板、內墻和作業臺應采用耐水、耐藥的材料，如經過油漆，鋪上瓷磚或玻璃，或采用磨光水泥等，通氣口要安裝排風扇，定期開機更換空氣。無菌室設內外二間，外間小些，為緩沖室，供工作人員換衣、帽、鞋、口罩之用。備有衣帽鉤和拖鞋架。內間較大，接種用，備有工作臺，放物臺，小型離心機，真空抽氣機等。內外間分別安裝紫外燈，操作前至少開燈20分鐘。室內定期用甲醛和高錳酸鉀熏蒸。
    主要設備：紫外光源、超凈工作臺、消毒器、酒精燈、接種器械（接種鑷子、剪刀、解剖刀、接種針）等。
    培養室：培養室是將接種的材料進行培養生長的場所。培養室的大小可根據需要培養架的大小、數目、及其他附屬設備而定。其設計以充分利用空間和節省能源為原則。室內要求內壁保溫和油漆，具有磨光水泥的或油漆過的地板，頂高以2.6m為宜，易于控制溫濕度，窗戶上要裝雙層密封玻璃窗。有窗戶雖對保溫保濕不利，但有自然光射入，對苗的生長和無菌有好處。室內要有足夠的電源。室內要保持清潔，定期用20%新潔爾滅消毒，防止雜菌生長。
    由于熱帶植物和寒帶植物等不同種類要求不同溫度，最好不同種類有不同的培養室。培養架可分4－5層，上面安裝30－40Ｗ日光燈照明，每天照明10－16小時左右，用自動定時器控制。溫度最好保持在15－25℃左右。此外還可根據需要安置液體培養所需的搖床、轉床等。室內濕度也要求恒定，相對濕度以保持在70%～80%為好，可安裝加濕器。現代組培實驗室大多設計為采用天然太陽光照作為主要能源，這樣不但可以節省能源，而且組培苗接受太陽光生長良好，馴化易成活。在陰雨天可用燈光作補充。
    設備主要應有：空調機，供升降溫用；加熱器，供加熱用；溫度控制器，供恒溫用；定時器，供控制光照時間用；培養架，供放置培養瓶用，培養架的框子用木制或三角鐵制皆可，應漆成白色或銀灰色，每層隔板可用玻璃或木料制成，但光照效果要好；日光燈供光照之用。
2、常用藥品組織培養所需藥品主要用于培養基的配制，也有部分用于消毒，主要有以下幾類： 
    （一）消毒藥品
    主要有次氯酸鈉、次氯酸鈣、雙氧水、漂白精片、溴水、硝酸銀等。
    （二）無機鹽類(inorganic element)包括大量元素和微量元素兩類，主要的鹽類有KNO3、MgSO4·7H2O、NH4NO3、KH2PO4、CaCl2·2H2O、Fe2（SO4）3、Na2HPO4、CuSO4、NaNO3、Na2SO4、ZnSO4、MnSO4·4H2O、MnCl2·2H20、KI、H3BO3等，無機鹽是供外植體吸收的基本營養成分，各有不同作用，如N、P影響蛋白質的合成，Ca、K、S、Mg影響酶活性等。 
    （三）有機化合物(organic compound)
    主要有蔗糖、維生素類(vitamin)肌醇（myo—inosltol）、氨基酸（almino acide）等。其中蔗糖是不可缺少的碳源，也是滲透壓調節物質。維生素的主要作用是促進細胞分裂和誘導器官分化。氨基酸是蛋白質組成成分，也是有機氮源。
    （四）植物生長調節劑（hormone）
    用于組織培養的主要有生長素、細胞分裂素及赤霉素三大類： 
    ⒈生長素類(auxin) 主要有吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、2，4－D和吲哚丁酸（IBA）。2，4－D有利愈傷組織生長，NAA、IAA、IBA有利于器官分化     ⒉細胞分裂素類（cytokinin）主要有激動素（KT）、6－芐基腺嘌呤（BA）、玉米素（ZT）等。其作用是促進細胞分裂與分化，其中KT能明顯促進芽的分化而抑制根的形成。 
    ⒊赤霉素（gibberellic acid）以GA3運用最廣泛，有促進不定芽和幼株伸長的作用。 
    （五）有機附加物
    包括人工合成和天然的有機物，常用的有酵母提取物、椰乳、果汁等及相應的植物組織浸出液。對細胞和組織的增殖和分化有一定促進作用。此外瓊脂在組培中作為凝固劑，是外植體的支持體，常用濃度為0.5－1％。
    （六）水
    培養基用水原則上使用蒸餾水，去離子水等，尤其在對化學成分要求較精確的試驗中。但在組培苗的批量生產中，可選用自來水配制，以降低成本   
   

 

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