一、培養基明細:
名稱 規格 價格(元)
營養瓊脂(NA) 250g 80
2,3,5-氯化三苯四氮唑(TTC) 10g 135
溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨培養基 250g 75
脫脂乳 * *
青霉素G參照溶液 * *
磷酸鹽緩沖液(PH7.2) PBS 250g 80
二、備注
1、濕熱鏈球菌抑制法:
樣品經過80℃殺菌后,添加嗜熱鏈球菌菌液。培養一段時間后,嗜熱鏈球菌開始增殖。這時候加人代謝底物2,3,5一氯化三苯四氮哇(TTC),若該樣品中不含有抗生素或抗生素的濃度低于檢測限,嗜熱鏈球菌將繼續增殖,還原TTC成為紅色物質。相反,如果樣品中含有高于檢測限的抑菌劑,則嗜熱鏈球菌受到抑制,因此指示劑TTC不還原,保持原色。
2、嗜熱脂肪芽胞桿菌抑制法
培養基預先棍合嗜熱脂肪芽胞桿菌芽胞,并含有pH指示劑(澳甲酚紫)。加人樣品并孵育后,若該樣品中不含有抗生素或抗生素的濃度低于檢測限,細菌芽胞將在培養基中生長并利用糖產酸,pH指示劑的紫色變為黃色。相反,如果樣品中含有高于檢測限的抗生素,則細菌芽胞不會生長,pH指示劑的顏色保持不變,仍為紫色。
3、濕熱鏈球菌抑制法判斷方法
在白色背景前觀察,試管中樣品呈乳的原色時,指示乳中有抗生素存在,為陽性結果。試管中樣品呈紅色為陰性結果。如最終觀察現象仍為可疑,建議重新檢測。
4、嗜熱脂肪芽胞桿菌抑制法判斷方法
在白色背景前從側面和底部觀察小試管內培養基顏色。保持培養基原有的紫色為陽性結果,培養基變成黃色或黃綠色為陰性結果,顏色處于二者之間,為可疑結果。對于可疑結果應繼續培養30min再進行最終觀察。如果培養基顏色仍然處于黃色一紫色之間,表示抗生素濃度接近方法的最低檢出限,此時建議重新檢測一次。
5、4%2,3,5一氯化三苯四氮哇(TTC)水溶液
成分
2,3,5一氯化三苯四氮哩(TTC) 1g
滅菌蒸餾水 5mL
制法
稱取TTC,溶于滅菌蒸餾水中,裝褐色瓶內于2℃一5℃保存。如果溶液變為半透明的白色或淡褐色,則不能再用。臨用時用滅菌蒸餾水5倍稀釋,成為4%水溶液。
6、青霉素G參照溶液
成分
青霉素G鉀鹽 30.0mg
無菌磷酸鹽緩沖液 適量
無抗生素的脫脂乳 適量
制法 精密稱取青霉素G鉀鹽標準品,溶于無菌磷酸鹽緩沖液中,使其濃度為100IU/mL—1000IU/ml。再將該溶液用滅菌的無抗生素的脫脂乳稀釋至0.006IU/mL,分裝于無菌小試管中,密封備用。-20℃保存不超過6個月。
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