一、基本原理
各種菌對氧的要求是不同的,根據它們對氧的要求或所能耐受的量可將細菌分為四個類型。專性好氧菌必須在有氧的情況下生存,例如枯草芽孢桿菌;專性厭氧菌則要求在完全無氧的條件下生長繁殖,分子氧對它們有害,例如破傷風梭菌(Clostridiumtetani)、丙酮丁醇梭菌(C.acetobutylcum)等;兼性厭氧菌無論在有氧或無氧的情況下均能生長,一般在有氧情況下生長快,例如酵母菌、腸道桿菌等屬于兼性厭氧菌;微好氧菌適宜于在氧濃度較低的環境中生長,例如鏈球菌屬中的個別種。
本實驗采用深層瓊脂法來測定氧對細菌生長的影響,在葡萄糖牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基試管中接入某種細菌,通過適宜的培養條件,若細菌只生長在培養基表面,則為好氧菌;只生長在培養基底部,為厭氧菌;若表面及全部培養基中都生長,為兼性厭氧菌;生長在培養基中上部,為微好氧菌(圖Ⅸ-2)。這樣,根據細菌在試管培養基中生長的部位,就可以判斷各種細菌對氧的需要程度。
二、器材
大腸桿菌,枯草芽孢桿菌,丙酮丁醇梭菌;
肉膏蛋白胨瓊脂試管培養基4支。
三、操作步驟
1.將肉膏蛋白胨瓊脂培養基試管置于水浴鍋中加熱溶化。
2.待培養基冷卻至50℃左右時,按無菌操作分別用接種環接種大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、丙酮丁醇梭菌各一環于試管培養基中,另一支試管中不接種作對照。搓動試管,使細菌均勻混于培養基內。
3.待凝固后,置于28℃溫室中培養48小時后開始觀察,連續觀察幾天,直至結果清晰時為止。
四、實驗報告
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