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出口食品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌檢驗方法——4



錄入時間:2008-12-26 13:15:17 來源:青島龙8娱乐官方网站生物

        附錄A  培養基和試劑     (補充件)
A1 月桂基硫酸鹽胰蛋白(月示)(LST)肉湯  
胰蛋白(月示)或胰酪胨(Trypticase)  20g   
氯化鈉               5.0g  
乳糖                5.0g  
磷酸氫二鉀(K2HPO4)         2.75g   
磷酸二氫鉀(KH2PO4)         2.75g  
月桂基硫酸鈉            0.1g  
蒸餾水               1000.0mL  
   將各成分溶解于蒸餾水中。分裝到有倒立發酵管的20mm×150mm試管中,每管10mL。121℃高壓滅菌15min。最終pH6.8±0.2。
A2 煌綠乳糖膽鹽(BGAB)肉湯  
蛋白胨             10.0g  
乳糖              10.0g  
牛膽粉(oxgall或oxbile)溶液   200.0mL   
0.1%煌綠水溶液        13.3mL   
蒸餾水                         1000ml  
  將蛋白胨乳糖溶于約500mL蒸餾水中,加入牛膽粉溶液200mL(將20.0g脫水牛膽粉溶于200 mL蒸餾水中,pH7.0~7.5),用蒸餾水稀釋到975mL,調pH7.4。再加入0.1%煌綠水溶液13.3mL,用蒸餾水補足到1000mL,用棉花過濾后,分裝到20mm×150mm試管(管內有倒立的小發酵管)中,每管10mL。121℃高壓滅菌15min。最終pH7.2±0.1。
A3 EC肉湯  胰蛋白(月示)或胰酪(月示) 20.0g  
3號膽鹽或混合膽鹽     1.5g   
乳糖           5.0g  
磷酸氫二鉀(K2HPO4)    4.0g   
磷酸二氫鉀(KH2PO4)    1.5g  
氯化鈉          5.0g   
蒸餾水            1000.0mL   
  將以上成分溶解于蒸餾水中,分裝16mm×150mm試管(管內有倒立的小發酵管),每管8mL。121℃高壓滅菌15min,最終pH6.9±0.1。
A4 伊紅美藍瓊脂(EMB)  
蛋白胨       10.0g   
乳糖        10.0g   
磷酸氫二鉀(K2HPO4) 2.0g   
瓊脂        15.0g  
伊紅γ(水溶性)    0.4g或2%水溶液20mL   
美藍        0.065g或0.5%水溶液13mL   
蒸餾水       1000.0mL  
  在1000mL蒸餾水中煮沸溶解蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂,加水補足至原量。分裝于三角燒瓶中。每瓶100mL或200mL,高壓滅菌15min。最終pH7.1±0.2。使用前將瓊脂融化,于每100mL瓊脂中加5mL滅菌的20%乳糖水溶液、2mL的2%伊紅γ水溶液和1.3mL0.5%的美藍水溶液,搖勻,冷至45~50℃傾注平皿。   
   

 

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