1實驗部分
1.1儀器和材料
實驗采用瑞典ThermometricAB公司的微量量熱儀,恒溫工作范圍為5~60℃,可維持±0.02℃不變,熱功率最小檢測限為2.5uw.
培養液為LB(Luria—Be~ani)培養基:將5gNaC1、5g胰蛋白胨和2.5g酵母浸粉,溶于500mL去離子水中,調節pH值至7.2,在120℃下高壓滅菌20min,在冰箱中放置備用.大腸桿菌DH5a由大連化學物理研究所生物質高效轉化課題組提供,于-2O℃下保存菌種,實驗時取菌種接種于10mLLB培養基中,于37℃下振蕩培養過夜,再以體積分數為2%的接種量接入10mLLB培養基中,于37℃下振蕩至OD600=0.5.頭孢哌酮鈉和頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉由湖南省藥品檢驗所提供.
1.2實驗方法
實驗采用安瓶法:即將10mLLB培養基置于20mL已滅菌的玻璃安培瓶中,加入不同濃度的頭孢菌素,然后將大腸桿菌DH5a接種到上述溶液中,接種量約為10cells/mL.將裝有相同體積培養液的安培瓶作為參比,將上述安培瓶密封后分別放入量熱儀的測量和參比通道中,該系統的溫度控制為37℃,由計算機開始自動記錄實驗數據.
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