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出口畜產品中炭疽桿菌檢驗方法——3



錄入時間:2008-12-18 15:37:56 來源:青島龙8娱乐官方网站生物 

7 結果的判定和報告
7.1 結果的判定在菌落形態、細菌形態和肉湯生長特性三項中有一項不符合炭疽桿菌特征時,判為非炭疽桿菌。在其余五項試驗(確定試驗)中有兩項或更多項不符合炭疽桿菌特征時,判為非炭疽桿菌;全部符合或僅有一項不符合炭疽桿菌特征時,判為有炭疽桿菌。7.2 結果的報告
7.2.1 凡結果判為非炭疽桿菌的檢驗樣品,報告該樣品所代表的同批產品“經檢驗未發現炭疽桿菌”。
7.2.2 凡結果判為有炭疽桿菌的檢驗樣品,報告該樣品所代表的同批產品“經檢驗發現炭疽桿菌”。
附 錄 A培養基和試劑(補充件)
A1 溶菌酶多粘菌素瓊脂(Knisely)
營養瓊脂(見A4) 1 000mL
多粘菌素 3 000IU
溶菌酶 4 mg/mL 
溶液 10 mL
乙酸亞鉈 4 mg/mL 溶液 10 mL
EDTA 20 mg/mL 溶液 10 mL
除營養瓊脂外,將其他成分用滅菌蒸餾水配成適當貯備液,按以上量加于冷至 50~55℃ 的滅菌營養瓊脂內,充分搖勻,傾注平板。
A2 戊烷脒多粘菌素瓊脂
A2.1 基礎培養基
牛肉膏 3.0g
蛋白胨 20.0g 
氯化鈉 5.0g
瓊脂 20.0g
蒸餾水 1 000.0mL
將各成分加于蒸餾水中,煮沸至完全溶解,調整pH至7.4,過濾,分裝于三角燒瓶中,每瓶400mL,121℃高壓滅菌 20min。臨時用加熱融化,放于 45~50℃恒溫水浴內保溫。
A2.2 戊烷脒稀釋液稱取戊烷脒 0.1g,溶于 4mL滅菌蒸餾水內。貯存在 0~4℃ 冰箱,備用。
A2.3 多粘菌素稀釋液取多粘菌素 B一瓶,加滅菌蒸餾水使其溶解,再用滅菌蒸餾水將其稀釋為3000IU/mL。貯存于0~4℃冰箱,備用。
A2.4 脫纖維羊血以無菌操作采羊血 50~10 mL ,注入含玻璃小珠的滅菌三角燒瓶中,立即轉搖數分鐘。貯存于 0~4℃冰箱,備用。
A2.5 完全培養基基礎培養基(45~50℃) 400.0 mL戊烷脒稀釋液 0.4 mL多粘菌素稀釋液 0.4 mL脫纖維羊血 8.0 mL以無菌操作將后三種成分加入基礎培養基內,充分搖勻,傾注于滅菌皿內,每皿15mL左右。
A3 營養肉湯.
牛肉膏 3.0g
蛋白胨 20.0g
氯化鈉 5.0g
蒸餾水 1000.0mL
將各成分溶于蒸溜水中,調整pH至7.4,分裝于試管內,每管1.0mL,121℃高壓滅菌15min。 
A4 營養瓊脂
牛肉膏 3.0g
蛋白胨 20.0g
氯化鈉 5.0g
瓊脂 20.0g
蒸餾水 1 000.0mL
將各成分加于蒸餾水中,煮沸至完全溶解,補足失去的水分,調整pH至7.2,過濾,121℃ 高壓滅菌 20 min 。待冷至 50℃左右時,傾注于平皿,制成平板。   
   

 

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