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志賀菌屬——微生物學檢查



錄入時間:2008-12-9 16:51:47 來源:青島龙8娱乐官方网站生物

一、微生物學檢查 
(一)標本 
    取糞便標本應挑取糞便的膿血或黏液部分,避免與尿液混合。應在使用抗生素之前采樣,標本應新鮮,若不能及時送檢,宜將標本保存于30%甘油緩沖鹽水或專門運送培養基內。中毒性痢疾患者可取肛拭子。 
(二)分離培養與鑒定 
    將標本接種于腸道鑒別或選擇培養基上,37℃孵育18—24h。挑取無色透明可疑菌落做生化反應和血清學試驗,以確定其菌群(種)和菌型。 
(三)毒力試驗 
    測定志賀菌的侵襲力可用Sennery試驗。系將受試菌18—24h的固體培養物,以生理鹽水制成9億/ml菌懸液,接種于豚鼠眼結膜囊內。若發生角膜結膜炎,則Sennery試驗陽性,表明受試菌有侵襲力。測定志賀菌的ST,可用Hela細胞或Vero細胞,也可用PCR技術直接檢測其產毒基因stxA、stxB。 
(四)快速診斷法 
1、免疫染色法將糞便標本與志賀菌抗血清混勻,在光鏡下觀察有無凝集現象。 
2、免疫熒光菌球法:將標本接種于含有熒光素標記的志賀菌免疫血清液體培養基中,37℃孵育4—8h。若標本中含有相應型別的志賀菌存在,則生長繁殖后與熒光抗體凝集成小球,在熒光顯微鏡下易被檢出。 
3、協同凝集試驗:以志賀菌lgG抗體與Gowan葡萄球菌結合成為試劑,用來檢測病人糞便中有無志賀菌可溶性抗原。 
4、膠乳凝集試驗用志賀菌抗血清致敏膠乳,使與糞便中的志賀菌抗原起凝集反應。也可用志賀菌抗原致敏膠乳,來檢測糞便中有無志賀茵抗體。 
5、分子生物學方法:用PCR技術、基因探針檢測1.40MDa的大質粒等。 
二、防治原則 
    非特異性防治措施包括:水、食物和牛奶的衛生學監測,垃圾處理和滅蠅;隔離病人和消毒排泄物;檢測發現亞臨床病例和帶菌者,特別是飲食從業人員;抗生素治療感染個體。 
    志賀菌的免疫防御機制主要依靠腸黏膜表面的slgA,而slgA需由活菌作用于黏膜局部才能誘發。因此,目前致力于活疫苗的研究。主要分為3類,即減毒突變株、用不同載體菌構建的雜交株以及營養缺陷減毒株。例如,鏈霉素依賴株活疫苗是一種減毒突變株;環境中存在有鏈霉素時始能生長繁殖。將其制成活疫苗給志愿者口服后因正常人體內不存在鏈霉素,該sd株不能生長繁殖,但也不立即死亡,尚可有一定程度的侵襲志愿者腸黏膜而激發局部免疫應答,產生slgA。同時,血清中的lgG、lgM特異抗體也增多。sd活疫苗的免疫保護具有特異性。 目前已能生產多價志賀菌sd活疫苗。多種雜交株活疫苗也在研究之中。如將志賀氏菌的大質粒導入另一弱毒或無毒菌中,形成二價減毒活疫苗。曾被選為研究對象的有宋內志賀菌與傷寒沙門菌Ty2ia的雜交疫苗等。 
    治療志賀菌感染的藥物頗多,但此菌很易出現多重耐藥菌株。同一菌株可對5-6種甚至更多藥物耐藥,給防治工作帶來很大困難。   
   

 

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