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肺炎支原體冷凝集實驗



錄入時間:2008-12-3 14:46:24 來源:青島龙8娱乐官方网站生物

【原理】  原發性非典型性肺炎患者血清中常產生冷凝集素。冷凝集素是一種自身抗體,在寒冷(4℃)情況下,可與紅細胞抗原起反應,一般可與O型人紅細胞或自身紅細胞發生凝集反應,可用于該病的輔助診斷。冷凝集反應具有可逆性,若將已凝集的紅細胞再放回37℃時,凝集現象即消失。 
【材料】 
1、患者血清:切勿將血液放在冰箱內析出血清,在冬季室溫低于-20℃時,可將標本置于37℃孵箱析出血清,隨即分離進行實驗。 
2、人紅細胞懸液:“0”型血或患者自身的抗凝血以無菌,0.9%氯化鈉溶液稀釋至2%。 
【方法】 
1、于試管架上排列小試管10支,每管內各加0.9%氯化鈉溶液0.5ml。 
2、加患者血清0.5ml于第1管內混勻后,吸出0.2ml加入第2管內,順次連續稀釋至第9管,混勻后棄去0.5ml。第10管不加血清作為對照。 
3、每管內各加入25血細胞懸液0.2ml,振蕩混合后,置冰箱內24小時或過夜。此時各管血清最終稀釋度依次為1:4,1:8,1;16,1:32,1:64,1:128,1;256,1:512,1;1024                               
【結果】 
1、冷凝集有可逆性,在較暖的室溫中,凝集現象迅速消失,故在冰箱內取出試管后,應立即觀察結果。 
2、取出時盡量避免震動,先觀察管底紅細胞沉淀形狀,再輕搖試管,如有明顯的凝集現象,記錄凝集效價。 
3、對照管內的紅細胞,輕搖后應完全分開,無凝集現象。 
4、如遇陽性結果,最好將試管再放入37℃水浴箱內5—30分鐘,重新觀察一次,如紅細胞完全分散,凝塊消失,則證實為真正的冷凝集現象,否則可能由于其他凝集素所致,不作陽性報告。    
   

 

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