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炭疽芽胞桿菌串珠實驗



錄入時間:2008-12-3 14:34:28 來源:青島龙8娱乐官方网站生物

  炭疽桿菌的幼齡培養物常呈鏈狀排列,在含有低濃度青霉素(0.05—0.5U/ml)的培養中,可以發生形態變異;由于細胞壁的合成被抑制,菌體內部滲透壓高,菌體膨脹為圓球形,并相聯呈串珠狀,而其他需養芽胞桿菌則不出現這種現象,具有較高的鑒別意義。 
【材料】 
1、青霉素(50—100U/ml)。 
2、濾紙條(0.3cm*1.5cm)、載玻片、營養瓊脂。 
3、炭疽芽胞桿菌4—6小時肉湯培養物。 
【方法】 
濾紙片法:取融化后的營養瓊脂傾注平板(厚3cm),待凝固后,用小刀切成1.5cm*3.0cm的瓊脂塊移于載玻片上,用接種環將炭疽芽胞桿菌46小時肉湯培養物均勻地涂布于瓊脂塊表面,待干后,用小鑷子取1張0.3cm*1.5cm的滅菌濾紙條,浸以每ml含有50—100U的青霉素液,然后橫貼于瓊脂塊的一端,置于濕盒內,于37℃培養4—6小時取出,加蓋玻片或直接用高倍鏡檢查。在青霉素自然擴散的一定范圍內可見炭疽芽胞桿菌呈串珠狀生長。 
2、瓊脂薄片法 
(1)取普通瓊脂加熱溶化,按每毫升0.05—0.5U/ml的量加入青霉素,充分搖勻,倒人無菌平皿,其厚度為1mm左右。 
(2)待瓊脂凝固后,用消毒小刀切成蓋玻片大小的方塊,平放在潔凈無菌載玻片上。 
(3)取新鮮瓊脂斜面培養物接種于肉湯內,37℃培養6小時左右并振勻的培養物一接種環種于瓊脂小方塊上,把載玻片放平皿中,皿內放一小團濕棉球,蓋上平皿蓋。 
(4)37℃溫箱作用2—4小時,取出載玻片,蓋上蓋玻片,用低倍或高倍鏡檢查。 
【結果】  炭疽桿菌菌體膨脹為圓球形,并相聯呈串珠狀。    
   

 

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