由于只有帶β-棒狀桿菌噬菌體的白喉棒狀桿菌才產生外毒素。因此,判斷從標本中分離出的白喉棒狀桿菌是否具有致病性,必須做毒力實驗,其方法有下列兩種。
瓊脂平板毒力實驗(Elek平板毒力實驗)
將含白喉抗毒素的濾紙條貼于Elek平板上,再在培養液上與濾紙條垂直劃線接種白喉棒狀桿菌,如為產毒株,則白喉棒狀桿菌產生的毒素(抗原)與白喉抗毒素在比例適當處結合,產生免疫沉淀反應,生成乳白色沉淀線。
【材料】
1、白喉棒狀桿菌標準產毒株及類白喉桿菌呂氏血清斜面24時培養物。
2、待測菌株。
3、Elek培養液。
4、白喉抗毒素(500U/ml)、無菌兔血清或豬血清、滅菌濾紙條(75mm*5mm)。
【操作】
1、取Elek培養液15ml,加熱融化,待冷至50—55℃時,加入3ml無菌兔血清或豬血清,立即混勻,傾入無菌平皿中。
2、待瓊脂凝固后,將浸有白喉抗毒素(500U/ml)的濾紙條(75mm*5mm)放于平板中央,將平板置37℃溫箱中1—2小時,以使培養液表面干燥 。
3、將待測細菌分別與濾紙條成垂直方向作劃線接種。測定未知標本時應同時用陽性(白喉棒狀桿菌)及陰性(類白喉桿菌)作對照。
4、將平板置37℃溫箱培養18—24h小時后觀察結果,觀察在接種線與濾紙間有無可見的乳白色沉淀線。
上一篇:疑似白喉患者咽拭子的細菌學檢查
下一篇:軍團菌的鑒定