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白喉棒狀桿菌毒力實驗



錄入時間:2008-12-2 16:34:56 來源:青島龙8娱乐官方网站生物

   由于只有帶β-棒狀桿菌噬菌體的白喉棒狀桿菌才產生外毒素。因此,判斷從標本中分離出的白喉棒狀桿菌是否具有致病性,必須做毒力實驗,其方法有下列兩種。 
瓊脂平板毒力實驗(Elek平板毒力實驗) 
    將含白喉抗毒素的濾紙條貼于Elek平板上,再在培養液上與濾紙條垂直劃線接種白喉棒狀桿菌,如為產毒株,則白喉棒狀桿菌產生的毒素(抗原)與白喉抗毒素在比例適當處結合,產生免疫沉淀反應,生成乳白色沉淀線。                 
【材料】 
1、白喉棒狀桿菌標準產毒株及類白喉桿菌呂氏血清斜面24時培養物。 
2、待測菌株。 
3、Elek培養液。 
4、白喉抗毒素(500U/ml)、無菌兔血清或豬血清、滅菌濾紙條(75mm*5mm)。 
【操作】 
1、取Elek培養液15ml,加熱融化,待冷至50—55℃時,加入3ml無菌兔血清或豬血清,立即混勻,傾入無菌平皿中。 
2、待瓊脂凝固后,將浸有白喉抗毒素(500U/ml)的濾紙條(75mm*5mm)放于平板中央,將平板置37℃溫箱中1—2小時,以使培養液表面干燥 。 
3、將待測細菌分別與濾紙條成垂直方向作劃線接種。測定未知標本時應同時用陽性(白喉棒狀桿菌)及陰性(類白喉桿菌)作對照。 
4、將平板置37℃溫箱培養18—24h小時后觀察結果,觀察在接種線與濾紙間有無可見的乳白色沉淀線。    
   

 

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