【材料】 
1、疑似白喉患者的咽拭子標本。 
2、載玻片、革蘭染色液、美藍染色液、奈瑟染色液。 
3、呂氏血清斜面、血瓊脂及亞碲酸鉀血瓊脂平板、淀粉及糊精發酵管。 
【操作】 
  一、檢查程序
二、操作： 
1、直接鏡檢 
（1）涂片：取載玻片兩塊，將疑似白喉患者的咽拭子于每塊載玻片中部輕輕滾動，涂片范圍約2cm*1cm，干燥后固定（涂片前應先接種平板以減少污染）。 
（2）染色：將制備好的涂片，一片用革蘭染色，另一片用美藍染色
（3）觀察：涂片經革蘭染色后，注意有無革蘭陽性、細長、菌體一端或兩端膨大呈棒狀的桿菌，菌體有無著色較深的紫色的“異染顆粒”，排列是否規則。涂片經美藍染色后，注意有無菌體呈淺藍色、異染顆粒呈深藍色的棒狀桿菌。如發現有革蘭陽性棒狀桿菌、排列不規則、有明顯異染顆粒，或美藍染色發現具有明顯異染顆粒的棒狀桿菌，均應報告“找到棒狀桿菌”，而不直接報告“找到 白喉桿菌”。 
2、初步鑒定 
（1）將上述咽拭子標本接種于 呂氏血清斜面，37℃培養6—8小時。白喉棒狀桿菌在本培養液上較其他咽喉中的細菌生長快，菌落呈灰白色、有光澤、圓形、凸起、光滑。取菌落涂片，奈瑟染色（或其他染色），鏡檢可初步鑒定。 
（2）再將咽拭子標本分別接種于血瓊脂及亞碲酸鉀血瓊脂平板，37℃培養24小時以分離純種。觀察血瓊脂平板上有無灰白色、不溶血或溶血（輕型白喉桿菌）的菌落，亞碲酸鉀血瓊脂平板上有無黑色的菌落。 
（3）從血瓊脂及亞碲酸鉀血瓊脂平板上各取典型菌落涂片、染色（革蘭染色或美藍染色或奈瑟染色），注意染色性、菌體形態與排列、有無異染顆粒。 
3、純培養取上述培養液上的典型菌落（鏡檢初步證明系白喉棒狀桿菌 ）接種于呂氏血清斜面作純培養（供生化實驗及毒力實驗用），37℃培養24h小時。 
4、生化實驗從上述呂氏血清斜面上挑取菌落接種于淀粉及糊精發酵管，37℃培養24h小時，觀察是否分糖淀粉及糊精。 
5、毒力實驗。   
   

 

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