涂片染色能查到結核分枝桿菌者，一般需要每毫升痰液內含菌量至少500個以上，甚至需達到5萬以上，所以結核患者痰標本直接涂片染色陽性率很低，經濃縮集菌后再進行染色鏡檢可顯著提高檢測的陽性率。
【材料】  結核患者24小時痰液，細口瓶，0.02%酚紅液、汽油或二甲苯，0.5%或4%氫氧化鈉，無菌0.9%氯化鈉溶液等。 
【方法】 
 一、漂浮法 
1、取24小時痰液15ml，裝入細口瓶內，加人2倍量0.5%氫氧化鈉搖勻，高壓滅菌或煮沸20—30分鐘殺菌。 
2、待冷后加人汽油或二甲苯2ml，用力振蕩20—30分鐘，用0.9%氯化鈉溶液加至液面與瓶口齊，靜置半小時。 
3、取瓶口表面油狀物涂于載玻片上，微微加熱，干后再加，如此重復5—6次，至厚度適宜，烘干待冷，抗酸染色后鏡檢。 
二、沉淀法 
1、取痰液1份與2倍量4%氫氧化鈉混合，高壓滅菌或煮沸20—30分鐘后，加入0.02%酚紅指示劑0.1ml，劇烈振蕩混勻，亦可置37℃水浴消化30分鐘。 
2、校正pH為7.0，3000r/min離心30分鐘，棄去上清液。 
3、取沉淀物涂片染色鏡檢。若進行分離培養和動物接種，則應免去高壓滅菌或煮沸的程序。   
   

 

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