1、材料
①7—8d日齡的雞胚,McCoY細胞或HL細胞。
②熒光顯微鏡,CO2孵箱。
③沙眼衣原體免疫熒光診斷試劑盒,吉姆薩染色液。
2、方法
(1)標本采集
①沙眼病人眼結膜標本的采集。在10%丁卡因局部麻醉下,用無菌狹長蓋玻片(0.5*2cm)刮取眼結膜上的濾泡組織,置于盛有1—2ml蔗糖磷酸鹽緩沖液的小玻璃瓶內,-4—20℃冰箱 內保存。
②男性尿道炎標本的采集。用無菌特制的尿道拭子伸入尿道口內2—4cm,旋轉數次,抽出置于保存液中。
③女性宮頸炎標本的采集。用無菌窺陰器張開陰道口,以無菌特制的宮頸拭子深入宮頸2—3cm2,旋轉數次抽出放人保存液中。分離培養時,從低溫冰箱取出,加入鏈霉素200U、萬古霉索,在4℃冰箱中處理過夜備用;也可在保存液中預先加入慶大霉素、兩性霉素。
(2)雞胚分離培養取7—8d日齡的雞胚,用8號針頭吸上述標本接種卵黃囊0.25ml,35℃溫箱培養,逐日觀察,將2d后死亡及9d后仍存活者予以解剖。收集卵黃囊膜并制成涂片,吉姆薩染色后油鏡觀察,如在涂片中找到紫紅色顆粒者為陽性。如活體解剖者,可盲目傳1—2代。如仍找不到細顆粒EB(原體)者為陰性。
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