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細胞培養中支原體污染的檢測



錄入時間:2008-11-24 15:54:26 來源:青島龙8娱乐官方网站生物

   細胞培養中最令人頭疼的問題之一是微生物的污染,而支原體的污染更給人一種看不見摸不著的感覺。長期以來,這個問題一直令細胞培養工作者困惑。在人們日常生活的工作環境中,支原體可以說無處不在,它可以通過人的毛發、口腔、穿著的衣服、動物的皮毛以及日常的細胞培養的操作環境造成對細胞污染。國內外研究表明造成細胞培養污染的支原體主要為以下四種支原體,即口腔支原體、精氨酸支原體、豬鼻支原體和萊氏無膽甾原體。但能夠造成細胞污染的支原體種類還很多,有些細胞甚至同時感染兩種以上的支原體。由于支原體體積很小,直徑約在0.2—2.0um之間,通常可以通過過濾膜而直接造成培養基或血清的污染。另外,被支原體污染的細胞培養基液體往往并不渾濁,細胞受損程度并不明顯,形態很少改變,這樣就更增加 了人們對其的防范難度。 
    從形態結構上,支原體形態多變,它多吸附在細胞表面或散于細胞與細胞之間。從其理化或生物學特性上講,所有支原體代謝均需膽固醇,部分需要精氨酸和葡萄糖。支原體的生存要求要比細菌高,同時,除需基本營養物質外,還需10—20%血清條件,最適pH值在7.8—8.0之間,多數支原體呈兼性厭氧,其繁殖方式主要是二分裂繁殖,分裂和其DNA復制不同步,可形成多核長絲體。由于支原體是一類缺乏細胞壁的微生物,因此它對作用于細胞壁類的抗生素(如青霉素G)不敏感。支原體對熱的抵抗力和細菌相似,而對環境滲透壓的變化比較敏感。支原體對細胞的影響,可以從兩方面考慮。一方面是對細胞的直接影響,細胞被支原體污染后,增殖緩慢,部分細胞變圓,從瓶壁上脫落,部分細胞雖然表面變化不十分明顯,實際上潛伏著多方面的危險。另一方面,支原體可以通過消耗培養基中的精氨酸,抑制細胞DNA、RNA的合成,降低細胞的抵抗力。因此,支原體污染對細胞的影響是非常廣泛和深遠的。   
   

 

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