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一、用途
用于濾膜法測定生活飲用水及其水源水中的總大腸菌群。
二、培養基配方（g/L）：
|
蛋白胨 |
10.0 |
|
磷酸二氫鉀 |
2.5 |
|
乳糖 |
10.0 |
|
無水亞硫酸鈉 |
3.3 |
|
堿性品紅 |
0.3 |
|
瓊脂 |
12.5 |
|
pH7.4±0.2 25℃ |
|
此配方可以進行改良或增加營養成分以獲得最佳的結果。
三、試驗原理:
? 蛋白胨提供氮源、維生素、氨基酸和碳源；磷酸二氫鉀是緩沖劑；乳糖是大腸菌群可發酵的糖類；堿性品紅為指示劑，具有醌式結構，呈深紅色，亞硫酸鈉能將堿性品紅還原，使其褪色，所以制成的培養基呈淡粉紅色；發酵乳糖的細菌產生乙醛，與亞硫酸鈉結合，可恢復堿性品紅的醌式結構，所以菌落呈深紅色；沙門氏和志賀氏菌屬細菌不發酵乳糖，故菌落與培養基同為淡紅色或無色；瓊脂是培養基的凝固劑。
四、試驗方法：
?? 1. 稱取本品39.0g，加入20ml無水乙醇和980ml蒸餾水中加熱攪拌溶解，分裝，121℃高壓滅菌15分鐘，備用。
? 2. 制備質控菌液，選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml，均勻涂布于待測平板以及參比平板上，每一稀釋度接種兩個平板。
?? 3. 用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環，將接種環接觸容器邊緣3次去除多余液體，在平板表面劃六條平行直線，同時接種兩個平板。
4. 36±1℃倒置培養基培養24±2小時，記錄實驗結果。
五、試驗結果：
接種以下質控菌株，36±1℃需氧培養22-26小時：
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質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數 培養基 |
方法 |
質控評定標準 |
其他特征 |
|
金黃色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
紫紅色菌落，有金屬光澤 |
|
產氣腸桿菌 |
CMCC(B)45103 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
紫紅色菌落 |
|
陰溝腸桿菌 |
ATCC23355 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
紫紅色菌落，有金屬光澤 |
|
弗氏檸檬酸桿菌 |
ATCC43864 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
紫紅色菌落，有金屬光澤 |
|
傷寒沙門氏菌 |
ATCC14028 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
無色菌落 |
圖1 Endo培養基微生物質控結果
?備注：a：陰溝腸桿菌，b:弗氏檸檬酸桿菌，c:產氣腸桿菌，d:大腸埃希氏菌，e：沙門氏菌，f:金黃色葡萄球菌
六、方法的局限性：
本培養基僅為細菌鑒定的一部分，需做其他補充試驗。
相關產品：
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