一、 產品用途
&??nbsp; 用于O157菌的選擇性分離培養(GB/T4789.36-2008,GB4789.28-2013)。
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二、培養基配方(g/L):
蛋白胨 |
20.0 |
山梨醇 |
10.0 |
三號膽鹽 |
1.5 |
氯化鈉 |
5.0 |
中性紅 |
0.03 |
結晶紫 |
0.001 |
瓊脂 |
15.0 |
pH7.2±0.2 25℃ |
此配方可以進行改良或增加營養成分以獲得最佳的結果
三、試驗原理:
蛋白胨提供氮源、維生素和生?長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;山梨醇為可發酵的糖類;三號膽鹽、結晶紫抑制革蘭氏陽性菌,亞碲酸鉀抑制非0157的大腸桿菌,頭孢?克肟抑制變形桿菌;中性紅為pH指示劑;瓊脂是培養基的凝固劑。
四、試驗方法:
&n??bsp;1.稱取本品51.5g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝三角瓶,每瓶200ml,121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻至45℃±1℃左右時,加入一支改良山梨醇麥康凱瓊脂添加劑(含頭孢克肟0.01mg,亞碲酸鉀0.5mg),?混勻,傾入無菌平皿,備用。
2.制備質控菌液,選擇合適稀釋度的目標菌??質控菌液0.1ml,均勻涂布于平板上,每一稀釋度接種兩個平板。
3.用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環,將接種環接觸容器邊緣3次去除多余液體,在平板表?面用三區法或六線法劃線,同時接種兩個平板。
五、試驗結果:
接種以下質控菌株,36±1℃培養24-48h:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量 (CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質控評定標準 |
其他特征 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
大腸埃希氏菌O157:H7 |
ATCC35150 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
無色菌落,褐色中心 |
傷寒沙門氏菌 |
ATCC14028 |
/ |
/ |
定性 |
- |
無色菌落 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
|
|
定性 |
- |
粉紅色菌落,周圍有膽鹽沉淀 |
六、方法的局限性:
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
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