一、洋蔥伯克霍爾德菌群簡介
洋蔥伯克霍爾德氏菌(Burkholderia cepacia,BC)原名洋蔥假單胞菌,最初是由腐爛的洋蔥根莖中分離得到,為革蘭氏陰性桿菌,產黃色色素,在TSA上菌落呈黃色,后根據rRNA序??列重新分類,歸屬于新成立單獨的霍爾德氏菌屬,屬內其他種包括??唐菖蒲伯克霍爾德氏菌、鼻疽伯克霍爾德氏菌、越南伯克霍爾德氏菌等。
洋蔥伯克霍爾德菌群(Burkholderia cepaciacomplex,BCC)是一類生化反應相似的霍爾德氏菌菌群,目前包括20多個種(包括洋蔥伯克霍爾德氏菌、多噬伯克霍爾德氏菌、神秘伯克霍爾德氏菌等),9種基因型。由于生化反應特征相似,通常需要用PCR方法進行區??分。此菌群具有較強的耐藥性,甚至能以部分抗生素做為碳源生長利用,若藥品中出現此菌,就會存在可能失效的風險,在USP中規定不得檢出,而中國國家藥典委員會也在2022年公布了BCC檢查法草案的公示稿。
二、活化方法
培養基的選擇:可選擇TSA/TSB、NA/NB、BHI等培養基進行活化。
操作方法:若菌種為凍干粉形式,按照說明書溶解后,可直接涂布或劃線至瓊脂平板上,也可加入至液體培養基中;若菌種為甘油凍存管形式,從冰箱中取出速融后,涂布或??劃線至平板上,也可加入至液體培養基中。
注:此菌活化后在平板上存活時間不長,制作菌懸液應使用新鮮活化的培養物(?2-3天的培養物)。
三、實驗室常用保存方法
此菌在室溫下易死亡,在-20℃也不易長期保存,因此建議在-70℃以下的條件超低溫冷凍保存,可使用甘油凍存法、瓷珠保存??法、脫脂牛奶保存法等方法,可保存兩年以上沒有問??題。
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