一、用途及試驗原理

  用途：用于豬肺炎支原體的培養。

  原理：蛋白胨，牛心浸粉，酵母浸粉提供氮源，維生素，氨基酸和生長因子。

二、培養基配方（g/L）

三、試驗方法

  1、稱取本品1??7.6g，加熱溶解于800mL純化水中，121℃高壓滅菌15分鐘，冷卻至室溫，無菌操作加入200 mL豬血清，混勻，分裝，備用。

  2、制備質控菌株，接種至培養基中，做10倍系列稀釋，稀釋至10^-9，并做空白對照。

  3、放置于36℃±1℃恒溫培養箱中，微需氧培養7-14天。

四、試驗注意事項

  1、若使用非一次性試管等容器進行試驗，容器?使用前應使用蒸餾水沖洗干凈，確保無洗滌液等殘留物，以免增加試驗的不確定性或污染。

  2、滅菌結束后，試管口會有水珠，在?進行梯度稀釋時，水珠很容易與空氣中的細菌接觸以致污染，因此，試管口應灼燒至干燥，膠塞也需過火，振蕩操作后，若培養基接觸到膠塞，還需再次進行灼燒操作。

  3、調節pH時，使用的酸堿試劑需是無菌的。

  4、支原體培養前應使用封口膜封口，可提供微需氧環境以及降低污染的風險。

五、質控結果

  接種以下質控菌株，放置于36℃±1℃恒溫培養箱中，需氧培養7-14天。??豬肺炎支原體培養至11天的試驗結果如圖1所示。

圖1 豬肺炎支原體疫苗培養基培養豬肺炎支原體11天時的試驗結果

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