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一、試驗原理：
該培養基用于大腸埃希氏菌O157:H7/NM的選擇性增菌培養。
? 蛋白胨提供微生物生長所需的碳源、氮源、維生素和生長因子；乳糖為可發酵碳水化合物，可作為一種能量來源；3號膽鹽可抑制革蘭氏陽性菌的生長；氯化鈉維持均衡的滲透壓；結晶紫對革蘭氏陽性菌如葡萄球菌、白喉桿菌，以及綠膿桿菌、白念珠菌、表皮癬菌有殺滅作用，對其他革蘭氏陰性菌和抗酸菌幾乎無作用；中性紅為指示劑。
? 添加劑：每瓶需配套添加10盒HB8659a改良麥康凱肉湯添加劑使用，每200mL改良麥康凱肉湯添加1支添加劑。
二、培養基配方（g/L）：
|
蛋白胨 |
20.0 |
|
乳糖 |
10.0 |
|
3號膽鹽 |
1.5 |
|
氯化鈉 |
5.0 |
|
中性紅 |
0.03 |
|
結晶紫 |
0.001 |
|
pH值7.2±0.1（25℃） |
|
三、試驗方法：
? 1. 稱取本品36.5g，加熱攪拌溶解于1000mL蒸餾水中，分裝三角瓶，每瓶200mL，121℃高壓滅菌15分鐘，冷卻45℃±1℃時，加入1支改良麥康凱肉湯添加劑，混勻，分裝無菌試管，每管9mL，備用。
2. 10倍梯度稀釋法制備質控菌株菌懸液。
3. 選擇適宜稀釋度的菌懸液接種于培養基中。
4. 放置于36℃±1℃需氧培養17h-19h，觀察試驗結果。
四、試驗結果判斷：
接種以下質控菌株，放置于36℃±1℃需氧培養17h-19h，試驗結果如圖1所示。
|
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量 （CFU） |
參比或 計數培 養基 |
生長情況 |
其他特征 |
|
大腸桿O157 大腸埃希氏菌 金黃色葡萄球菌 |
ATCC 35150 ATCC 25922 ATCC 6538 |
10-100 1000-5000 1000-5000 |
TSA |
在CT-MAC上>10CFU |
菌落無色， 中心灰褐色 |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
1000-5000 |
TSA |
在TSA上<10CFU |
|
|
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
1000-5000 |
TSA |
在TSA上<10CFU |
|
圖1 改良麥康凱肉湯（CT-MAC）微生物質控結果
圖2 培養液接種的試驗結果
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