一、試驗原理

  哥倫比亞血瓊脂基礎（HB0124）營?養非常豐富，可用于培養各種營養要求苛刻的細菌。特殊蛋白胨為多種蛋白胨類混合物，提供細菌生長所需的氮源、氨基酸、維生素及生長因子，促進營養要求苛刻的細菌生長；可溶性淀粉提供碳源；氯化鈉維持平衡的滲透壓；瓊脂是凝固劑。

  本培養基使用時需配套添加無菌脫纖維羊血（1001339-1）?使用。?脫纖維羊血中含有蛋白質和生長促進因子。進一步保障營養要求苛刻的微生物生長，如鏈球菌等。血液添加入含瓊脂培養基中，不僅可促進微生物快速生長繁殖，也可以觀察溶血現象，不同的細菌都有其特定的溶血環，可據此對細菌進行一定程度的鑒別。

二、培養基配方（g/L）

三、試驗方法

  1、稱取本品39.0g，加熱溶解于1000mL蒸餾水中，分裝，121℃高壓滅菌15分鐘，冷卻至5??0℃左右?時，加入5%-10%無菌脫纖維羊血，混勻備用。

  2、準備質控菌株，接種至哥倫比亞血瓊脂上。

  3、放置于36℃±1℃恒溫培養箱中，需氧培養18h-24h。

四、質控結果

  接種以下質控菌株，按規定的適宜條件培養后，菌株培養結果見圖1。

圖1 哥倫比亞血瓊脂基礎培養基的微生物質控結果

五、注意事項

  1、培養基中含少量淀粉，若滅菌前未加熱煮沸溶解，滅菌后冷卻可能出現少量白色沉淀。

  2、無菌脫纖維羊血需置于2℃-8℃進行保存，在試驗過程中，無菌脫纖維羊血要提前拿出使其自然恢復至室溫后再使用，以免與瓊脂溫差過大，導致羊血與??液態瓊脂混合時瓊脂接觸到低溫羊血瞬間凝固產生瓊脂塊影響平板制備效果。

  3、培養基在加入無菌脫纖維羊血時，要注意培養基溫度，避免過高或過低，以45℃-50℃為宜，可通過恒溫水浴鍋進行溫度控制。同時要控制好錐形瓶搖動混勻的力度，以免產生較多氣泡，影響所制平板的外觀質??量和使用效果。可?閱讀相關文章：《》進一步了解學習。

  4、因哥倫比血??瓊脂營養成分及其豐富，十分利于各種細菌微生物生長，故在制備及使用哥倫比亞血瓊脂的過程中請務必注意無菌操作，以免造??成雜菌污染，影響試驗結果。

  5?、無菌脫纖維羊血產品源自羊血液制得，故保質期較短（1個月），建議在選購本產品時充分考慮試驗所需用量，避免一次性過多購入導致產品超保質期失效。為保證效果穩??定，盡量避免同一瓶無菌脫纖維羊血反復取用（2℃-8℃保存/恢復室溫），這可能導致血液成分加速氧化、失活，也會帶來更大的雜菌污染風險，無菌脫纖維羊血在出現變色后應避免再次使用。

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