一、大腸埃希氏菌簡介

  大腸埃希氏菌（Staphylococcus aureus）是隸屬于埃希氏菌屬的一種常見的菌株，革蘭氏染色為陰性桿菌，兩端呈鈍圓形，直徑約0.5μm，生化代謝非常活躍，發酵葡萄糖產酸、產氣，個別菌株不產氣，大腸桿菌還能發酵多種碳水化合物，也可以利用多種有機酸鹽，是人和動物腸道中的正常棲居菌，某些血清型的大腸桿菌在一定條件下可??以引起人和多種動物發生胃腸道感染或尿道等多種局部組織器官感染??。

二、活化方法

  培養基的選擇：大腸埃希氏菌的生命力強，易存活，對??營養要求不高，常用的非選擇性培養基大多數都可以用來對大腸埃希??氏菌活化及傳代，如營養肉湯/瓊脂、胰蛋白胨大豆肉湯/瓊脂、腦心浸液肉湯/瓊脂等。

  注：??對菌種進行活化和傳代時，通常不使用麥康凱瓊脂、VRBA瓊脂、EE肉湯等選擇性培養基。

  操作方法：若菌種為凍干粉形式，按照說明書溶解后，可直接涂布或劃線至NA/TSA/BHI平板上，也可加入至NB/TSB/BHI等液體培養基中；若??菌種為甘油凍存管形式，從冰箱中取出速融后，NA/TSA/BHI平板上，也可加入至NB/TSB/BHI等液體培養基中；若菌種為瓷珠形式，挑取瓷珠可轉入NA/TSA/BHI平板上，也可加入至NB/TSB/BH??I等液體培養基中，30-37℃培養18-24h。

三、實驗室常用保存方法

  1.斜面保存法

將NA/TSA/BHI等培養基制成斜面管，接種大腸埃希氏菌后培養至菌落生長良好，置于2-8℃可保存至少??1個月，超過1個月容易出現菌種老化、污染、變異等現象，建??議及時傳代。

  2.脫脂牛奶/甘油/瓷珠冷凍保存法

可挑取非?選擇性培養基上培養好的大腸埃希氏菌至脫脂牛奶??/液體/瓷珠菌種保存管中制成約109CFU/mL的菌液（瓷珠保存法需搖勻后棄菌液保留瓷珠），置于冰箱或液氮罐中冷凍保存，在-70℃以下可保存兩年以上，在-20℃也能保存一年以上，大腸埃希氏菌生命力強，很容易保存數年或數十年。

四、菌種的確認

  1.菌落特征：大腸埃希氏菌麥康凱平板上由于發酵乳糖產酸，菌??落呈粉紅色，并在菌落周圍出現膽鹽沉淀的渾濁圈。在EMB瓊脂上發酵乳糖產酸，形成具黑色中心有綠色金屬光澤的菌落

麥康凱平板	EMB平板

  2.革蘭氏染色：大腸埃希氏菌菌為革蘭氏陰性無芽孢桿菌，短桿菌，兩端呈鈍圓形。

  3.生化特性：大腸埃希氏菌可在44.5℃下發酵乳糖產酸產氣。

乳糖蛋白胨培養液

  4.IMViC試驗：此實驗可用做大腸埃希氏菌的確證試驗。

  大腸埃希氏菌與非大腸埃希氏菌的生化鑒別：

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