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芽孢桿菌培養基的補充介紹及注意事項

張宇名
錄入時間:2023-7-25 16:09:12 來源:青島龙8娱乐官方网站生物

一、試驗原理與介紹

  芽孢桿菌屬??細菌較大(4μm ~10μm),革蘭氏陽性菌,是嚴格需氧或兼性厭氧的有莢膜的桿菌。芽孢桿菌屬可分為以下亞群:多黏芽孢桿菌??、枯草芽孢桿菌(包括蠟樣芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌)、短芽孢桿菌和炭疽芽孢桿菌。

  本培養基用于芽孢桿菌平板計數,葡萄糖為細菌生長提供碳源;氯化鉀可以維持培養基均衡的滲透壓;酵母提取物、硫酸銨為細菌生長提供氮源;磷酸鈣有利于促進細菌芽孢的快速生??成,硫酸錳、七水硫酸鎂、硫酸亞鐵提供細菌菌體生長以及芽孢生成所需的微量元素。


二、培養基配方(g/L)

葡萄糖

10.0

磷酸鈣

5.0

硫酸銨

0.5

氯化鉀

0.2

七水硫酸鎂

0.1

硫酸錳

0.0001

硫酸亞鐵

0.0001

酵母提取物

0.5

瓊脂

20.0

pH 7.0±0.2(25℃)


三、試驗方法

  1、稱取本品36??.3g,加熱溶解于1000mL蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌30分鐘備用。

  2、制備菌種懸液,接種至芽孢桿菌培養基上。

  3、放置于36℃±1℃恒溫培養箱中,需氧培養48h-72h。


四、質控要求

  ??接種以下質控菌株,放置36℃±1℃恒溫培養箱中,需氧培養48h-72h。菌株培養結果見圖1。

質控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

回收率

生長情況

其他特征

蠟樣芽孢桿菌

CMCC(B) 63303

20-200

≥70%

+++

白色小菌落

枯草芽孢桿菌

CMCC(B) 63501

20-200

≥70%

+++

白色小菌落


圖1 芽孢桿菌培養基的微生物質控結果

圖1 芽孢桿菌培養基的微生物質控結果


五、注意事項

  1、該培養基中含不溶性磷酸鈣,高壓滅菌后存在白色沉淀,倒平板前需充分搖勻培養基,重懸磷酸鈣均?勻分布于培養基中,再進行倒平板操?作,以免造成平板白色背景不均勻,影響試驗結果。

  2、該培養基倒板后平板整體呈白色,在試驗完畢讀取菌數時可能發生不易辨別計數的情況,可采用置于燈檢箱或打光等方式進行輔助讀??數。

  3、芽孢桿菌在挑菌置于稀釋液中振蕩分散的過程中,菌苔不易散開,不易形成均勻態菌懸液,這可能導致后續?稀釋涂布結果菌數不穩定或涂布菌數不?易掌握,可以通過縮小相鄰稀釋度的稀釋倍數,進行多梯度稀釋度涂布,設立多組平行對照等方式,得到所需的涂布菌數范圍,保證試驗的有效性。


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注:本文屬龙8娱乐官方网站生物原創,未經允許不得轉載。

 

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