1)培養基平皿表面水珠凝聚,造成涂布培養后菌落蔓延無法計數。
2)培養后計數結果超標。
3)培養后沒有逐日觀察,造成菌落生長成團,無法計數或計數結果統計錯誤。
2、原因分析及解決措施
情況①:培養基平皿表面水珠凝聚的原因在于澆碟的時候,培養基溫度高,在平皿表面會形成水珠。
解決措施:培養基平皿表面水珠凝聚
◆培養基制備
培養基制備的一般流程:
①上午10點開始用干粉培養基天平稱重,11點20開始滅菌,13:00開鍋,??在滅菌鍋中冷卻至13:30。
②將對照培養基置于50℃水浴鍋中待用。
知識點:滅菌鍋滅菌結束時,需要及時開鍋,避免培養基長時間在滅菌鍋中缺氧,造成培養基品質下降,??培養基適用性失敗且影響實驗結果。
◆培養基澆碟
5?0℃水浴鍋取出后,一般5分鐘之內將培養基澆置空平皿中。平皿冷卻后,觀察培養基表面有無水珠,若無水珠則可直接進行涂布操作。多余的培養基可以放置在生物安全柜中或置密封袋(不是呼吸袋)里2-8℃保存。
若有水珠,若需要當天使用則打開平皿蓋,輕輕甩掉表面?的水珠,在運行的生物安全柜中放置0.5-1h直到表面沒有水珠,然后進行涂布計數。
若不需要當天使用:
直接放置在生物安全柜中,蓋上平皿,生物安全柜關機,7天內使用。
 ?; 裝入自封袋中保存?在2-8℃冰箱中,2周內使用。使用前,提前一天取出,使平皿中水珠自動蒸發消失。
情況②:培養后計數結果超標的原因在于菌懸液制備不均勻。
?? 每次?制備的時候要渦旋3000轉30s,使用前再渦旋3000轉10s。特別是黑曲霉和白色念珠菌這種容易在底部沉底的菌,尤其需要注意。
情況③:培養后沒有逐日觀察,造成菌落生長成團。
無法計數或計數結果統計錯誤,可以參考下圖解決這個問題。
文章來源:微信公眾號微生物菌種網
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