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Honda氏產毒肉湯的原理和使用方法

張宇名
錄入時間:2023-5-18 15:04:23 來源:青島龙8娱乐官方网站生物

一、試驗原理

  本培養基用于致瀉大腸埃希氏菌毒培養,致瀉性大腸埃希氏菌分為:產腸毒?素性大腸埃希氏菌(ETEC)、腸道侵襲性大腸埃希氏菌(EIEC)、?腸道致病性大腸埃希氏菌(EPEC)、腸集聚性黏附性大腸埃希氏菌(EAEC)和腸出血性大腸埃希氏菌(EHEC)5種。

  酪蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持細菌平衡的滲透壓;磷酸?氫二鉀具有緩沖作用;葡萄糖為可發酵糖類;硫酸鎂促進微生物生長發育;氯化鐵、氯化鈷?能促進微生物毒素的產生;林可霉素(潔霉素)用于抑制厭氧菌和革蘭陽性球菌生長,對革蘭陰性菌以及真菌無活性。


二、培養基配方(g/L)

酪蛋白胨

20.0

酵母浸粉

10.0

氯化鈉

2.5

磷酸氫二鉀

15.0

葡萄糖

5.0

硫酸鎂

0.025

氯化鐵

0.0025

氯化鈷

0.01

pH 7.5±0.1(25℃)


三、試驗方法

  1、稱取本品52.54g,加熱溶解于1?000mL蒸餾水中,121??℃高壓滅菌15分鐘,待冷卻至45℃-50℃左右時,加入過濾除菌的林可霉素溶液(90μg/mL),混勻備用。

  2、制備菌種懸液,接種至Honda氏產毒肉湯中。

  3、放置于36℃±1℃恒溫培養箱中,需氧培養18h-24h。


四、質控結果

  接種以下質控菌株,放置36℃±1??℃恒溫培養箱?中,需氧培養18h-24h。菌株培養結果見圖1。

質控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

生長情況

其他特征

大腸埃希氏菌

ATCC 8739

10-100

+++

渾濁

大腸埃希氏菌

ATCC 25922

10-100

+++

渾濁


圖1 Honda氏產毒肉湯的微生物質控結果

圖1 Honda氏產毒肉湯的微生物質控結果


五、注意事項

  1、培養基中含少量硫酸鎂、氯化鈷、氯化鐵,滅菌后可能出現微量沉淀。

  2、?林可霉素屬?于林可酰胺類抗生素,121℃高溫易產生分解影響其功效,故采用過濾除菌方式在Honda氏產毒肉湯高壓滅菌冷卻后加入,務必避免一同高壓滅菌。


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注:本文屬龙8娱乐官方网站生物原創,未經允許不得轉載。


 

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