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非選擇性分離/計數固體培養基的出廠檢驗及驗收方法

紀旭艷
錄入時間:2023-4-17 14:57:08 來源:青島龙8娱乐官方网站生物

一、非選擇性分離/計數固體培養基的介紹

  非選擇性分離/計數固體培養基常用于細菌的計數、活化、分離純培養等用途,含瓊脂一般為1.2%-1.5%,可使用傾注法計數或制成平板涂布法計數使用??,也可制成??斜面用于菌種的傳代保存,常見的有平板計數瓊脂(PCA)、營養瓊脂(NA)、胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)等,培養基的組成為基礎營養成分,無抑制性,一般不具有針對性,適用于大多數細菌的培養。


二、培養基的出廠檢驗-生長率測定

  1.菌液制備

??   將質控菌株接種至非選擇性肉湯或平板中進行活化培養(通常可使用TSB或TSA),使用生理鹽水或磷酸鹽緩沖液進行十倍系列稀釋至適宜梯度。

  2.培養基準備

  將待測培養基及參比培養基按標簽制備進??行滅菌,制成平板備用(若采用傾注法接種,可將滅菌后的培養基置4??7-50℃水浴保溫備用)。細菌通常用TSA做參比培養基,真菌通常使用SDA,有特殊營養要求的菌可選用適宜的無抑制性培養基做為參比培養基。

  3.接種及培養

  吸取0.1m?L制備好的菌懸液,分別涂布至待測培養基和參比培養基,每平板接種水平為20-200C??FU,至少接種2塊平板,將接種好的培養基置于標準規定的條件下進行培養。

  4.結果計算及判定

??   生長率PR=NS(待測平板菌落總數)/NO(參比培養基平板菌落總數,應≥100CFU),目標菌在待測培養基上應有典型的生長,生長率??應不小于0.7。


三、培養基的驗收方法

  將質控菌株接種至非選擇性肉湯培養基中過夜培養制成工作菌懸液,使用1μL接種環挑取1環菌液,按照標準的方法連續劃16線,置于標準規定的??溫度培養,如果僅一半的線有稠密??菌落生長,則G為0.5。如果劃線上沒有菌落生長、生長量少于劃線的一半或菌落生長微弱,則G為0,計算G值總和,應達到G≥6。

注:本文屬龙8娱乐官方网站生物原創,未經允許不得轉載。

 

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