一、培養基用途:
用于啤酒中乳酸菌檢測的分離培養基。
二、原理:
酵母浸粉、酪胨和肝浸粉提?供氮源、維生素、生長因子;葡萄糖、麥芽糖和果糖提供碳源;磷酸氫二鉀為緩沖劑;檸檬酸銨、硫酸鎂、硫酸錳、吐溫-80和N-乙酰葡萄糖胺為培養各種乳酸菌提供生長因子;本培養基pH較低,抑制了其它細菌的生長,有利于乳酸桿菌的分離;瓊脂是培養基的凝固劑。為增加選擇性可加入2-苯乙醇和放線菌酮,可抑制?革蘭氏陰性菌和酵母菌。
三、培養基成分
成分 |
含量(g/L) |
酵母浸粉 |
5.0 |
酪胨 |
20.0 |
肝浸粉 |
1.0 |
麥芽糖 |
10.0 |
果糖 |
5.0 |
葡萄糖 |
5.0 |
鹽酸甜菜堿 |
2.0 |
檸檬酸銨 |
2.0 |
天門冬氨酸鉀 |
2.5 |
硫酸鎂 |
0.98 |
硫酸錳 |
0.42 |
磷酸氫二鉀 |
2.0 |
N-乙酰葡萄糖胺 |
0.5 |
谷氨酸鉀 |
2.5 |
瓊脂 |
16 |
pH 5.2-5.6 25℃ |
四、操作方法
1、稱??取??本品74.9g,另取吐溫80 10g,混勻,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌15分鐘,制備成平板備用。
注:該培養基溶解后可能出現少量沉淀。
2、制備質控菌液
3、選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml,均勻的涂布于平板上,每一稀釋度涂布兩個平板??。
4、36±1℃培養48±2小時,記錄實驗結果。
五、實驗結果
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
其他特征 |
嗜酸乳桿菌 |
CICC6005 |
10-100CFU |
白色凸起菌落 |
植物乳桿菌 |
ATCC8014 |
10-100CFU |
白色凸起菌落 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
抑制或部分抑制 |
注:A為嗜酸乳桿菌;B為植物乳桿菌;C為大腸埃希氏菌
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