固體培養,就是利用固體培養基進行微生物的繁殖,由于微生物貼附在營養基質表面生長,所以又稱表??面培養。實驗室固體培養方法用于菌種的分離、純化、保藏和生產種子的制備,常見方法如下
1、適用于好氧和兼性好氧微生物的培養
(1)平板劃線培養方法:
用接種針蘸取菌樣;在平板固體培養基表面劃線。
(2)平板涂布培養法:
用涂布棒將少量的液體培養物涂布在整個固體培養基表面。
(3)將少量液體培養物與融化后降溫至46??~50℃的固體培養基混勻,倒入培養皿中,澆注成平板。接種后的培養物直接放入培養箱中恒溫培養。
(4)斜面接種培養法:
? 接種針火焰灼燒滅菌;管口置近火怕處??;用接種針隨取幽樣后,移到斜面上劃線。接種后的培養物直接放入培養箱中恒溫培養。
2、適宜于微好氧微生物生長
穿刺接種:玻管中加入固體培養基,滅菌后將蘸取菌樣的穿刺接種針(頭部無環)垂直插人固體培養基?內,再原路拔出。然后塞上橡皮塞。越靠近培養基深處越缺氧,生長的菌厭氧程度越高。
3、適用于厭氧菌培養
(1)在斜面接種?后,將培養管棉塞上部截去或用火點著燒掉,用玻璃棒將管內部分的棉花壓至離培養基1cm處,棉塞上方再壓入一含水的脫脂棉,加入1:1比例混合的焦性沒食子酸和碳酸的粉未,立即加上橡膠塞。焦性沒食子酸和碳酸鈉在有水的情況下,緩慢作用,吸收氧氣,放出CO2造成無氧環境。
(2)將厭氧微生物固體培養物放在真空干燥器內,用泵排出其中的空氣,并可進一步向其中充人氮氣或95%氮氣和5%二氧化碳的混合氣體,再放置一定的溫度環境中培養??。
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