一、氫氧化細菌和鐵載體的簡介:
氫氧化細菌(Hydrogen-oxidizing bacteria)是一類能通過氧化氫氣獲得能量,固定二氧化碳作為唯一碳源的微生物,土壤中分布廣泛,尤其是豆科植物根際大量存在。氫氧化細菌沒有單獨的分類,多分布在假單胞菌屬、副球菌屬、黃桿菌屬、分支桿菌屬、產堿菌屬、諾卡氏菌屬、醋酸桿菌屬及棒桿菌屬等。絕大部分氫氧化細菌是兼性化能自養型,它們可以自養生長、異養生長、甚至混合營養生長,好氧或兼性厭氧。氫氧化細菌屬于植物根際促生菌,在農作物增產方面有巨大的應用潛力,所以其各種促生機制的研究已成為熱點,其中分泌鐵載體就是幾種重要??的促生機制之一。
鐵載體(sidero??phore)是一類能特異性結合鐵離子并供給微生物細胞的低分子量物質。鐵元素是微生物生長的必需元素,在缺鐵的環境中微生物會分泌鐵載體螯合鐵離子滿足自身生長需要。目前,常用的鐵載體檢測方法為Schwyn和Neilands發明的通用CAS瓊脂平板法,當細菌產生的鐵載體與由鉻天青S(CAS)、十六烷基三甲基溴化銨(HDTMA)、鐵離子組成的藍色復合物結合后,會奪走鐵離子,使細菌周圍的培養基顏色由藍色變為橘黃色,出現鐵載體分泌圈,有利于判斷細菌是否產生鐵載體。
二、CAS檢測培養基
1. 產品用途:用于細菌鐵載體篩選試驗。
2. 配方(mg/L):
鉻天青S(CAS) |
60.5 |
十六烷基三甲基溴化銨(HDTMA) |
72.9 |
六水氯化鐵 |
2.645 |
二水磷酸二氫鈉 |
295.25 |
十二水磷酸氫二鈉 |
1213.5 |
氯化銨 |
125 |
磷酸二氫鉀 |
37.5 |
氯化鈉 |
62.5 |
瓊脂 |
9000 |
pH值6.8±0.1(25℃) |
三、試驗方法:
1. 稱取本品10.87g,加熱煮沸完全溶解于1000mL蒸餾水中,分裝三角瓶??,116℃高壓滅菌30分鐘,冷卻至50℃時,傾入無菌平皿,備用;
2. 用接種環挑取質控菌株新鮮培養物點種到平板上;
3. 放置35℃需氧培養24小時,記錄試驗結果。
四、試驗結果判斷:
接種以下質控菌株,放置于35℃需氧培養24小時。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
質控結果 |
銅綠假單胞菌 |
ATCC 9027 |
/ |
/ |
菌落周圍有黃色環 |
圖1 銅綠假單胞菌ATCC 9027在CAS檢測培養基菌落特征
相關產品:
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