一、試驗原理:
用于金黃色葡萄球菌的選擇性增菌培養。
蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源、氮源、維生素和礦物質;較高濃度的氯化鈉提供較高的滲透壓,抑制大多數非?葡萄球菌的微生物。
二、培養基配方(g/L):
蛋白胨 |
10.0 |
牛肉浸粉 |
5.0 |
氯化鈉 |
75.0 |
pH 7.4±0.1 25℃ |
三、試驗方法:
1、培養基制備:稱取本品90.0g, 加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝三角瓶或試管,121℃高壓滅菌15分鐘,??備用。制備好的液態培養基保存于2-8℃,應避免光線直接照射。干燥培??養基應放置于陰暗干燥處,室溫保存。
2、制備質控菌液。
3、接種
3.1混合菌的接種
&nb??sp; 在裝有待測培養基的試管中接種10-100CFU的目標菌,并接種1000-5000CFU的非目標菌,接種總量1ml,同時接種兩個平行管,混勻。同時分別將目標菌菌懸液(與試管接種同一稀釋度)和非目標菌菌懸液(比試管接種小10-100倍稀釋度)1ml傾注平板,接種兩個平板,作接種量計數用,36±1℃培養18-24小時。
3.2非目標菌接種
在裝有待測培養基的試管中接種1000??-5000CFU的非目標菌,接種量1ml,同時接種兩個平行管,混勻,36±1℃培養18-24小時。
4、培養液的接種
4.1混合菌培養液的接種
用10μL接種環取1?環經培養后的混?合菌培養液,換線接種到Barid-Parker上,每管接種一個平板,36±1℃培養45-48小時。
4.2非目標菌培養液的接種
吸取??10μL經培養后??的非目標菌培養液,均勻涂布接種到TSA上,每管接種一個平板。也可使用傾注法進行接種,36±1℃培養18-24小時。
5、記錄實驗結果
目標菌在選擇性平板上的菌落應>10CFU,則表示待測?液提培養基的生長率良好;非目標菌在非選擇性平板上的菌落<100CFU,則表示待測液體培養基的選擇性為良好。
四、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養18-24小時:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
方法 |
質控結果 |
其他特征 |
金黃色葡萄球菌 大腸埃希氏菌 |
ATCC6538 ATCC25922 |
10-100 1000-5000 |
半定量 |
在Barid-Parker上 >10CFU |
菌落黑色凸起,周圍 渾濁帶,外層透明圈 |
金黃色葡萄球菌 大腸埃希氏菌 |
ATCC25923 ATCC25922 |
10-100 1000-5000 |
在Barid-Parker上 >10CFU |
菌落黑色凸起,周圍 渾濁帶,外層透明圈 |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
1000-5000 |
在TSA上<100CFU |
/ |
圖1 7.5%氯化鈉肉湯微生物質控結果
備注:a:金黃色葡萄球菌(ATCC25923),b:金黃色葡萄球菌(ATCC65?38),c:大腸埃希氏菌,d:?空白
相關產品:
注:本文屬龙8娱乐官方网站生物原創,未經允許不得轉載。