【原理】
某些細菌如變形桿菌屬,可產生苯丙氨酸脫氨酶,使苯丙氨酸脫去氨基形成苯丙硐酸,加入三氯化鐵試劑后產生綠色反應。
【成分】
試劑甲:
試劑乙:
L 苯丙氨酸
0.1g
磷酸緩沖液pH7.2-7.4
10ml
三氯化鐵
0.8g
蒸餾水
10ml
【制法】
(1)分別用磷酸緩沖液溶解L 苯丙氨酸和蒸餾水溶解三氯化鐵配制成10%L-苯丙氨酸溶液和8%三氯化鐵溶液;
(2)將10X10(mm)大小的濾紙片浸入甲液(10%L-苯丙氨酸溶液)中,取出后置室溫內待干或將紙片保存在密閉瓶中,保持一定的溫度,也可在臨用前浸濕;
(3)用較少脫脂棉制成小棉棒,置一干燥玻皿。內保存備用,也可在臨用前浸沾試劑。
【用途】
主要用于腸桿菌科之鑒定。變形桿菌屬和普羅菲登斯菌均為陽性,腸桿菌科及其它細菌則為陰性。測定苯丙氨酸脫氨酶時,將細菌沾抹在浸有試劑的紙片上,放在平皿中置37℃或50℃作用5-15分鐘后,加8%三氯化鐵溶液一滴于紙片菌落上,立即呈現綠色為陽性,黃色為陰性。
【注意事項】
1.測定變形桿菌脫氨酶時,如有其它細菌混合生長時可以不必分純,混合抹取菌落,按上法進行試驗,對變形桿菌的鑒定亦無影響。
2.此試劑可少量配制,保存于室溫或冰箱內均可,在使用過程中如發生混濁現象亦可使用。
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