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一、試驗用途及原理：
此試驗常用于綠膿桿菌和雙歧桿菌的生化鑒定。
蛋白胨和酵母粉提供基本營養需求；磷酸氫二鉀調節培養基的pH；葡萄糖酸鉀可被某些細菌分解?成還原性的葡萄糖，然后與班氏試劑發?生反應生成磚紅色沉淀。
二、培養基配方（g/L)
|
蛋白胨 |
1.5 |
|
酵母粉 |
1.0 |
|
磷酸氫二鉀 |
1.0 |
|
葡萄糖酸鉀 |
40.0 |
|
pH值7.0±0.2 25℃ |
|
班氏試劑配方（g/L)
|
檸檬酸鈉 |
173.0 |
|
碳酸鈉 |
100.0 |
|
五水硫酸銅 |
17.3 |
1.挑取待測菌的單菌落至無菌生理鹽水中，制備約109CFU/mL濃度菌懸液。
2.吸取100微升菌懸液加入到葡萄糖酸鹽生化管中，并放置于36±1℃，需氧條件下培養24±2小時（若培養雙?歧桿菌，需厭氧培養）。
3.培養結束后按1:1的比例加入班氏試劑，并將生化管置于沸水浴中水浴1-10分鐘，冷卻后觀察結果。如出現磚紅色沉淀，則為陽性；若顏色依為淺藍色，則為?陰性。
三、實驗結果：
|
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量 （CFU) |
參比或計 數培養基 |
方法 |
生長 情況 |
其他特征 |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
＞5000 |
/ |
定性 |
+++ |
(+)磚紅色(滴加班氏試劑) |
|
銅綠假單胞菌 |
ATCC27853 |
＞5000 |
/ |
定性 |
+++ |
(+)磚紅色(滴加班氏試劑) |
|
銅綠假單胞菌 |
ATCC9027 |
＞5000 |
/ |
定性 |
+++ |
(-)淺藍色(滴加班氏試劑) |
a：大腸埃希氏菌ATCC259??22；b：銅綠假單胞菌ATCC27853；c：銅綠假單胞菌ATCC9027；?d：空白對照
圖1 葡萄糖酸鹽試驗
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