一、培養基用途

 該培養基主要用于雙歧桿菌的增菌培養。

二、培養基配方（g/L)

三、檢驗原理

 蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、維生素和生長因子；葡萄糖為可發酵糖類；??半胱氨酸鹽酸鹽、維生素K1、氯化血紅素、硫酸鎂、氯化鈣、氯化鈉、碳酸氫鈉為培養各種雙歧桿菌提供生長因子；磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀為緩沖劑。

四、試驗方法

 1.稱取本品18.04g，加熱溶解于500ml蒸餾水中，121℃高壓滅菌??15分鐘，冷至50℃左右時，加入過濾除菌的維生素K1溶液0.5ml和氯化血紅素溶液(5mg/ml)2.5ml，混勻，備用。

&nb?sp;2.在無菌環境中，用10ml移液槍吸取備用的PYG液體培養基加到無菌空試管中，每支10ml，共六支。

 3.將質控菌株稀釋至合適梯度，用移液槍??吸取質控菌種100微升，加到分裝好的試管中，并立即在試管中加入適量無菌液體石蠟。

 4.將培養基放置于36±1℃厭氧環境中培養48小時，觀察和記錄實驗結果。

五、試驗結果

 接種以下質控菌株，放置于36±1℃厭氧環境中培養48小時。

 PYG液體培養基試驗結果：

a:長雙歧桿菌b:嬰兒雙歧桿菌c：空白對照

六、注意事項

 1.雙歧桿菌為厭氧菌，稀釋質控菌株到試驗完成，整個過程控制在15min之內。

 2.雙歧?桿菌為厭氧菌，在液體培養基中接入質控菌種后應加入適??量無菌液體石蠟以隔絕空氣或放入其他厭氧環境中。

 3.維生素K1溶液配制方法:稱取維生素K1 1g，加入無水乙醇99ml，過濾除菌。氯化血紅素溶液配制方法:稱取氯化血紅素0.5g溶于1mol/L氫氧化鈉溶液1ml中加蒸餾水至100ml，121℃高壓滅菌1??5min-20min，冰箱保存。?  

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