一、用途
本產品用于大腸菌群的確證試驗,非腸桿菌科細菌在此培養基中生長被抑制。
二、實驗原理
蛋白胨提供微生物生長所需的碳氮??源;乳糖是可發酵的糖類;煌綠是一種具有抑菌能力的染料??,牛膽粉和煌綠抑制非腸桿菌科細菌。
三、培養基配方(g/L)
成分 |
含量(g/L) |
蛋白胨 |
10.0 |
乳糖 |
10.0 |
牛膽粉 |
20.0 |
煌綠 |
0.0133 |
pH7.2±0.1 |
25℃ |
四、實驗方法
1.稱取本品 40.0g ,加熱??攪拌溶解于 1000ml 蒸餾水(可根據培養需要擴大或縮小產品用量),分裝到有倒立發酵管的 20mm*150mm 試管中,每管 10ml ,121℃高壓滅菌 15 分鐘,備用;
2.質控菌液按國家標準等標準或其它方法制備而成;
3.取相應菌液劃線接種于已滅好菌的液體培養基中;
4.將接好菌的試管放入恒溫培養箱,于36±1℃ 需氧培養24-48h,觀察實驗結果。
五、實驗結果判斷
1.外觀
此干燥培養基呈綠色顆粒狀態,高壓滅菌后制備好的液體培養基為綠色透明無沉淀溶液。
2.生物學實驗
接種以下質控菌株,放入培養箱中,于36±1℃培養24-48h觀察試驗結果。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
方法 |
質控情況 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
10-100 |
半定量 |
渾濁且產氣 |
弗氏檸檬酸桿菌 |
ATCC43864 |
10-100 |
半定量 |
渾濁且產氣 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
1000-5000 |
半定量 |
不渾濁不產氣 |
糞腸球菌 |
ATCC29212 |
1000-5000 |
半定量 |
不渾濁不產氣 |
沙門氏菌 |
ATCC14028 |
10-100 |
半定量 |
渾濁不產氣 |
煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)顆粒培養基微生物質控結果如圖:
六、注意事項
使用此培養基后續應輔助其他相關實驗驗證。
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