一、試驗原理
MC培養基是一種用于食品中嗜熱鏈球菌總數測定的培養基。
? 其所含大豆蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖和乳糖為可發酵糖類提供碳源;碳酸鈣可與微生物發酵代謝過程中產生的酸起反應,形成中性化合物和二氧化碳,防止培養基變酸,并初步辨別產酸菌;瓊脂是培養基的凝固劑;中性紅為pH 指示劑。
二、培養基配方(g/L)
成分 |
含量(g/L) |
大豆蛋白胨 |
5.0 |
牛肉浸粉 |
3.0 |
酵母浸粉 |
3.0 |
葡萄糖 |
20.0 |
乳糖 |
20.0 |
碳酸鈣 |
10.0 |
瓊脂 |
15.0 |
中性紅 |
0.05 |
pH值6.0±0.1 25℃ |
三、試驗方法
?? 1.稱取本品80.0g,加熱煮沸溶解于1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,并倒平板備用;
? 2.將質控菌株稀釋至合適梯度,用移液槍吸取100微升涂布于MC平板,并用MC平板做參比培養基;
3.將涂布好的平板放置于36±1℃需氧環境中培養48±2小時。
四、實驗結果與解釋
接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養48±2小時。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質控結果 |
其他特征 |
嗜熱鏈球菌 |
IFFI6038 |
20-200 |
MC培養基 |
定量 |
PR≥0.7 |
邊緣光滑紅色中等偏小菌落,背面粉紅色 |
嗜酸乳桿菌 |
CICC6005 |
20-200 |
MC培養基 |
定量 |
PR≥0.7 |
淡粉色菌落,有明顯溶鈣環 |
? 嗜酸乳桿菌在生長發酵過程中可產生大量乳酸,故可與碳酸鈣發生反應生成明顯溶鈣環;而嗜熱鏈球菌在發酵過程中也可產生L-乳酸和葉酸,與碳酸鈣發生反應生成較微弱溶鈣環。結果如圖一。
圖一
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