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實驗室常用滅菌方式介紹及應用

王娟
錄入時間:2020-12-22 10:07:50 來源:青島龙8娱乐官方网站生物

一、干熱滅菌


  常用于耐熱器皿的滅菌,如移液管、玻璃平皿、玻璃試管或金屬器皿等,可在170℃滅菌2-4h或200℃滅菌0.5-1h。??接種環、接種針、涂布棒等實驗器材可在酒精燈上直接進行灼燒滅菌。

  滅菌效果:滅菌效果強,可殺滅包括芽孢在內的所有微生物。

  注意事項:

  1.干熱滅菌過程的熱穿透效果差且比較慢,因此在烘箱內進行干熱滅菌時,不可擺放過滿;

  2.塑料、橡膠等不耐熱材質不可采用此方法滅菌;

  3.紙張、棉花滅菌溫度不能超過170℃;制備好的培養基不可采用此方法滅菌。


二、高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)


  常用于實驗室多數培養基滅菌,也可用于玻璃器皿、金屬器皿的滅菌。一般采用121℃高壓滅菌15-20min或116??℃高壓滅菌30min,根據培養基不同可對滅菌參數進行調整。

  滅菌效果:可殺滅包括芽孢在內的所有微生物。

  注意事項:

  1.滅菌鍋效力不達??標、滅菌過程冷空氣未排凈、培養基本身含芽孢過多、滅菌方式不正?確、滅菌鍋內物品擺放過滿都有可能導致滅菌失敗;

  2.在進行容器滅菌時,容器不可密封,需與滅菌鍋內空氣流通。


三、水浴/加熱/流動蒸汽滅菌


  常用于含不耐熱成分的培養基滅菌,如XLD瓊脂、亞硒酸鹽胱氨酸增菌液、亞硫酸鉍瓊脂等。采用流動蒸汽方式滅菌??的培養基,如沒有相應的流動蒸汽滅菌設備,可采用水浴加熱方式或“蒸”??的方式滅菌。

  滅菌效果:可??殺滅微生物繁殖體,不能殺滅芽孢體,采用此類方式滅菌的培養基通常具?有強抑菌性,或要求短時間內使用。

  注意事項:

&??nbsp; 1.不同培養基成分耐熱性有差別,加熱時應當注意,如含亞硒酸鹽的培養基(SC、SBG等)加熱至90℃左右即可,加熱過度會使亞硒酸氫鈉分解,培養基變紅,含瓊脂的培養基可加熱煮沸4-6次或沸水浴20-30min使瓊脂完全溶解即可;

  2.采用加熱滅菌方式的培養基,通常含有不穩??定成分,建議現配現用或按標準規定的期限使用,如不立即使用,可置于低溫或陰涼(2-8℃或10-20℃)處避光保存。


四、過濾除菌


  常用于抗生素或含不耐熱成分培養基的滅菌,一般使用0.22μm孔徑的微孔濾??膜或濾芯進行過濾除菌。實驗室制取無菌空氣也可采用此方法,使用特殊濾芯或濾網對空氣進行過濾除菌。

  滅菌效果:可除去普通細菌、真菌及芽孢體,但不能除去支原體、病毒等體積微小生物。

  注意事項:

  1.使用前通常需按照說明書使濾膜或濾芯浸濕;

  2.注意過濾速度和體積,需嚴格按照過?濾器或濾膜說明使用,速度過快或過濾體積超標都有可能導致濾膜破損,除菌失敗;

  3.黏度較大或有沉淀的培養基不適合用此方式除菌。


五、輻照滅菌


  微波、紫外線、X射線和γ射?線等均可用于滅菌。γ射線穿透力強,?滅菌效果好,被廣泛應用于食品、藥品行業產品滅菌,也常用于微生物培養基、實驗器材滅菌。一些特殊培養基或添加劑成分因不適合高溫蒸汽滅菌、過濾除菌等方法,可采用γ射線輻照滅菌。紫外線殺菌效果較弱,幾乎沒有穿透力,通常僅用于實驗室空氣或物體表面殺菌。

  滅菌效果:γ射線滅菌效果好,穿透力強,可殺死包括芽孢體在內的所有微生物。

  注意事項:

  1.并非所有培養??基都可以采用γ射線輻照滅菌方式,一些染料或不穩定成分經??輻照后會發生變化;

  2.γ射線會對瓊脂造成一定程度破壞,因此在進行固體培養基滅菌時,?需對輻照劑量和瓊脂添加量進行適當調整;

  3.玻璃制品、金屬制品一般不可采用此方法滅菌。


六、化學試劑滅菌


  常用環氧乙烷滅菌,以及各類消毒劑浸泡滅菌。環氧乙烷曾廣泛用于平皿??、一次性醫療產品的滅菌,但由于對環境污染較大,滅過菌的產品需長時間放置使環氧乙烷消散,現已逐步被其他滅菌方式取代。

  滅菌效果:不同消毒劑殺??滅效??果存在差異,大致上可分為低效消毒劑、中效消毒劑和高效消毒劑。環氧乙烷屬于高效消毒劑,可殺滅包含芽孢在內的所有微生物。

  注意事項:

  1.此類滅菌方式通常會有殘留,且對環境有污染,??因此一般?不適合用于直接進行微生物培養相關器皿滅菌;

  2.殺菌能力越強的消毒劑,刺激性、腐蝕性、毒性往往越大,使用時需注意防護。


  注:本文屬龙8娱乐官方网站生物原創,未經允許不得轉載。      &??nbsp;                                          

 

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