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遠藤氏瓊脂培養基的原理和使用方法

林嬌嬌
錄入時間:2020-9-18 10:05:31 來源:青島龙8娱乐官方网站生物

一、試驗原理:

 

 本培養基用于濾膜法測定生活飲用水及其水源水中的總大腸菌群。

 蛋白胨為微生物的生長提供氮源和維生素;乳糖為可發酵的糖類;瓊脂是培養基的凝固劑;磷酸氫二鉀為緩沖劑;亞硫酸鈉和品紅對革蘭氏陽性菌有弱抑制作用,加入20mL無水乙醇可以提高培養基的抑菌性。亞硫酸鈉可以使堿??性品紅還原脫色?,大腸桿菌可以發酵乳糖產生乙醛和酸,乙醛與亞硫酸鈉和品紅化合物結合形成紫紅色菌落,快速發酵乳糖的細菌使堿性品紅結晶析出,菌落產生綠色金屬光澤。

 

二、培養基配方(g/L):

 

蛋白胨

10.0

磷酸氫二鉀

2.5

乳糖

10.0

無水亞硫酸鈉

3.3

堿性品紅

0.3

瓊脂

12.5

pH ?7.4±0.2&nbs??p;      25℃

 

三、試驗方法:

 

&n?bsp;1、稱取本品39.0g,加入20 mL無水乙醇和980 mL蒸餾水中,加熱攪拌溶解,121℃高壓滅菌15 min,冷卻后傾入無菌空平皿中,備用。

 2、制備質控菌液,接種到培養基平板上。

 3、放置36±1℃需氧培養24±2小時。

 

四、結果觀察與解釋

 

 接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養24±2小時。

控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

參比或計數培養基

方法

質控結果

其它特征

大腸埃希氏菌

ATCC25922

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

紫紅色菌落,有金屬光澤

糞腸球菌

ATCC29212

/

/

半定量

G≤1

/

鼠傷寒沙門氏菌

ATCC14028

/

/

定性

/

橙紅色菌落

弗氏檸檬酸桿菌

ATCC43864

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

紫紅色菌落,稍有金屬光澤

大腸埃希氏菌

ATCC8739

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

紫紅色菌落,有金屬光澤

 

遠藤氏瓊脂培養基微生物質控結果

a:大腸埃希氏菌ATCC25922 b:糞腸球菌ATCC29212 c:鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028

d:弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864 e:大腸埃希氏菌ATCC8739



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