一、用途:
用于霉菌和酵母菌分離培養和計數(Merck標準)。
二、原理:
酵母粉提供碳源和氮源;葡萄糖提供能源;土霉素可抑制細菌的生長;瓊脂是培養基凝固劑。
三、培養基配方(g/L):
葡萄糖 |
10.0 |
酵母粉 |
5.0 |
瓊脂 |
15.0 |
pH 7.1±0.2 |
25℃ |
此配方可以進行改良或增加營養成分以獲得最佳的結果
四、實驗方法:
1、稱取本品15.0g,加熱攪拌溶解?于500ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻至50-55℃左右時,無菌操作加入過濾除菌土霉素50mg,混勻,傾入無菌平皿。
2、制備質控菌液。
3、選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml,均??勻涂布于平板上,每一稀釋度接種兩個平板。
4、用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環,將接種環接觸容器邊緣3次去除多余液體,在平板表??面劃六??條平行直線,同時接種兩個平板。
5、22±3℃倒置培養基培養48-72h,記錄實驗結果。
五、結果觀察及解釋:
接種以下質控菌株,22±3℃倒置培養基培養48-72h:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質控評定標準 |
其他特征 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
100-1000 |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
酵母菌 |
ATCC18790 |
10-100 |
沙氏葡萄糖瓊脂 |
定性 |
/ |
白色突起菌落 |
黑曲霉 |
ATCC16404 |
10-100 |
PR≥0.7 |
有黑色孢子 |
||
白色念珠菌 |
ATCC10231 |
10-100 |
PR≥0.7 |
白色突起菌落 |
六、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充實驗。
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