1.培養基
蛋白胨 |
5g |
明膠 |
100~150g |
水 |
1000ml |
pH7.2-7.4,分裝試管,??培?養基高度約4~5cm,間歇滅菌或115℃蒸氣滅菌20min
2.接種
取18~24h的斜面培養物穿刺接種,并有兩支未接種的空白對照。
3.結果觀察
于20℃溫箱中培養,2,7,10,14,和30天。在20℃以下的室溫觀察的生長情況和明膠是否液化。如菌已經生長,明膠表面無凹陷且為穩定的凝塊,則為明膠水解陰性。如明膠凝塊部分或全部在20℃以下變為可流動的液體,則為明膠水解?陽性。如菌已經生長,明膠未液化,但明膠表面菌苔下出現凹陷小窩(須與未接種的對照管比較,因培養過久的明膠因水分失散也會凹陷)也是輕度水解,按陽性記錄。若細菌未生長,則或是不在明膠培養基上生長,或是基礎培養基不適宜。
4.注意事項
(1)如有的菌在20℃不生長,則在30℃培養 生長后,觀察時放冰箱或冷水?中降溫待對照管凝固后再記錄。
(2)滅菌過高或過低易影響結果,一般用115℃蒸氣滅菌15min較為合適。
(3)明膠質量不一,在培養基中所用數量也難統一,以在20℃時凝固成穩定的凝塊為宜,龙8娱乐官方网站用天津試劑化工三廠的明膠,用量10%較為合宜。夏天明膠培養基不易凝固時,則用12%。為了??便于比較,在同一實驗室內,最好用同一牌號同一濃度的明膠。
本文節選自《常見細菌系統鑒定手冊》第十四章。
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