1.方法一

   (1)培養基

   滅菌后?調pH至6.8-6.9使培養基呈橘黃色或微帶粉紅色為宜，分裝試管，分裝散以適于擺斜面為度，l15℃蒸氣滅菌30min。20％的尿素溶液過濾滅菌后，?待基礎培?養基冷卻到50-55℃時，將滅菌的尿素溶液加到培養基中，終濃度為2%，然后擺成較大的斜面。

   (2)結果觀察

   接??種后適溫培養，分別于2h、4h過夜觀察。陰性結果要觀察4天，培養基呈桃紅色者為陽性，培?養基顏色不變者為陰性。

   (3)注意事項

   ①該實驗應有不加??尿素的空白對照（尤其是測定假單?胞菌時）；②應該有已知的陽性菌對照。

2.方法二

   將測定菌接在營養瓊脂斜面上，在第3天和第7天進行脲酶的測定。方法是：在空試管中，將斜面菌苔做成2ml濃菌懸液，加入一滴酚紅指示劑，調pH到7,即酚紅剛剛轉黃呈橙紅色，再將此菌懸液分作兩份，在其中的一管加入少許結晶的?尿素約0.05-0.1g,另一管不加尿素作為對照。如加尿素的試管?的幾分鐘變堿，酚紅指示劑變紅，則表示測定菌為脲酶陽性。不變者，則為陰性。

   本文節選自《常見細菌系統鑒定手冊》第十四章。

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