一、菌落形態

   1.平板制作將15～20 ml融化的營養瓊脂培養基冷卻至50℃左右，按無菌操作倒人直徑9 cm的培養皿內。如??有冷凝水，倒置于30～37℃溫箱內，使之干燥以便于單菌落的出現。

   2.單菌落平板（劃線法）一點菌苔或一環細菌懸液，在上述無冷?凝水的平板一側邊緣處，反復涂抹在直徑約為1 cm大小的面積上；燒灼接種環，冷卻后，從上述涂菌處劃出7～8條直線，前3～4條線的從涂菌處劃出，?后3～4條直線可不通過涂菌處，劃線時接種環與平板表面成30°～40°角，輕輕接觸，不要使接種環劃破表面；如上述燒灼、劃線操作再重復數次，以劃滿整個平板為宜；倒置平板，于最適溫度培養1～2天，出現單菌落。

 &?nbsp; 3.菌落形態觀察 形狀和大小、邊緣、表面、隆起形狀，透明度、?菌落及培養基的顏色等。

二、生長溫度和耐熱性

   最高、最適、最低和耐受溫度能力的特征常常是某些細菌鑒定的特征之一，?常用的測定溫度(℃)有4,20,30,37,41,45和65。

   以液體培養物(24h培養物）一小環轉入澄清營養肉汁或合適的液體培養基，置不同溫度培養。37℃以??上的測定應置水浴中??，需3次移種生長者才能確認。

耐熱性意味著細胞經受高溫還能存活，主要用?于鏈球菌的鑒定。在1m1合適的肉湯或脫脂牛奶中接種1滴24小時的培養物，于60℃水浴30 min,然后于35～37℃培養48 h,生長者則表明存活，糞腸球菌(Enterococcous f aecalis)為該測定的陽性對照。

三、氧和二氧化碳的需要

   氧和二氧化碳的需要??，常以對氧要求的不同程度來區別細菌，例如好氧菌、微好氧菌和厭氧菌以及兼性厭氧。測定方法有兩種：

   1.需氧性?測定將接種的培養物培養于不同條??件包括空氣、含5% CO2和10% O2厭氧罐中，分別測得需氧性。

   2.芽孢菌厭氧性測定

    （1）厭氧培養基

    （2）??接種與觀察：用一小環（外徑1.5mm的接種環）營養肉湯培養物穿刺于上??述培養基，培養于30℃，3天和7天分別記載，僅在表面生長者為好氧菌，如沿穿刺線牛長或下部生長者為兼性厭氧菌或厭氧菌。

    本文節選自《常見細菌系統鑒定手冊》第十三章。

上一篇：顯微鏡觀察方法

下一篇：氧化酶的生化特征鑒定