&n??bsp; 芽孢通常可??在革蘭氏染色片中看到,但在不易清晰觀察時,可用特殊的芽孢染色法,使芽孢與菌體分別呈現不同顏色,便于觀察。
(一)孔雀綠染色法
 ??; (1)將生有芽孢的斜面菌苔按革蘭氏染色法涂片后用飽和的孔雀綠(Malachite green)水溶液(約為7.6%)染10min
(2)用自來水沖洗
(3)用0.5%番紅液復染30s
(4)水洗,吸干
&nbs??p; (5)鏡檢:芽孢呈綠色,菌體和芽孢囊呈微紅色,但應注意菌體中有異染粒時,也可呈現綠色。
(二)石炭酸復紅染色法
1.染劑
(1)石炭酸復紅液
堿性復紅(Basic Fuchine,一品紅) |
|
乙醇飽和液(約10%) |
10ml |
石炭酸水溶液(5%) |
100ml |
兩液相混搖勻備用。
(2)酸性乙醇
乙醇(95%) |
100ml |
濃酸鹽 |
3ml |
(3)呂氏美藍染液
美藍(次甲基藍、亞甲藍、甲烯藍、Methylene blue) |
|
乙醇飽和液(約2%) |
30ml |
KOH水溶液(0.01%) |
100ml |
KOH 1%溶液1 ml加水99 ml即為0.015的KOH |
將兩液混合后備用,此液陳舊者更好。
2.染色步驟
(1)按常規涂片。
(2)滴加石炭酸復紅于涂片上,并于玻片下緩緩加熱,使染液冒蒸氣但不沸騰,并繼續滴加染液,不使涂?片上染液蒸干,這樣保持5 min。
(3)涂片冷后,傾去染液,用酸性乙醇脫色至無紅色染劑洗脫為止。
(4)徹底水洗。
(5)用呂氏美藍復染2~3 min。
(6)水洗、吸干、鏡檢。
3.觀察結果
鏡檢時,菌體及孢囊呈藍色,芽孢呈紅色。
本文節選自《常見細菌系統鑒定手冊》第十二章。
上一篇:判定試驗菌是否有運動性的方法
下一篇:莢膜的染色方法