（一）染劑

   1.甲液

   2.乙液

   待AgNO₃溶解后，取出10 ml備用，向其余的90 ml AgNO₃液中滴加濃氫氧化銨，則形成很濃的沉淀，再連續滴加氫氧化銨到剛溶解沉淀成為澄清溶液為止，再將取出的AgNO₃液慢慢滴入，出現薄霧，經輕搖后薄霧消失，繼續滴入AgNO₃液直至薄霧剛不消失為止。

（二）玻璃片準備

 &nbs??p; 選擇光滑無痕紋玻片，先用國產SDS液煮沸，為了充分接觸，將玻片置??特制玻片架，煮沸30 min,然后冷卻，再放入洗液，浸泡過夜，用水沖去殘酸，最后用蒸餾水沖洗，瀝干水，再放入95％乙醇脫水，取出玻片，以火焰去乙醇，立即使用。

（三）菌種準備

   需用新的培養物，一般用新制備斜??面，接種后16-24h為宜。如長期未移種，最好先連續移種活化2～3次。

（四）染色步驟

   （1）涂片：在載玻片的一端滴一滴蒸餾水，用接種環挑取斜面上少許菌??苔（注意不要挑上培養基），在載玻片的水滴中輕沾幾下，將玻片傾斜，使菌液緩慢流到另一端，然后平放在空氣中干燥。

   （2）涂片干燥后，滴加甲液染10min??,用蒸餾水沖洗，干燥或將殘水瀝干或用乙液沖去殘水后，加乙液染30-60s,加熱，使其稍冒蒸氣而染液不干，冷卻后用蒸餾水沖洗。

（五）結果觀察

   鏡檢時多觀察幾個視野，菌體為深褐色，鞭毛為褐色。

（六）注意事項

   （1）染液最好當日配??制，次日使用效果差，染出的鞭毛色淺，一般第三日不能再?使用此液。此法染鞭毛適于染較多的菌株。

   （2）一定要充分洗凈甲液后再加乙液，否則背景很臟。

   本文節選自《常見細菌系統鑒定手冊》第十二章。

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